目的： 探讨外源性硫化氢供体GYY4137对D半乳糖（DGal）诱导的衰老骨髓间充质干细胞（bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs）成骨能力的影响及潜在机制。方法： 应用不同浓度的DGal诱导BMSCs的衰老，CCK8法检测细胞活性及β半乳糖苷酶染色检测细胞衰老的程度，确定DGal的最佳诱导浓度；应用不同浓度GYY4137进行干预后，检测GYY4137对正常BMSCs及衰老BMSCs细胞活性的影响，确定GYY4137最佳干预浓度。实验设CON组、GYY4137组、DGal组、DGal+GYY4137组，作相应处理后对各组BMSCs进行β半乳糖苷酶染色，qRTPCR法检测衰老相关基因（P16、P21、P53）和衰老相关炎症因子（IL6、IL8、TNFα）的mRNA相对表达。对各组细胞进行成骨诱导分化，qRTPCR法检测成骨分化相关因子碱性磷酸酶（ALP）、骨钙素（OCN）、Runt相关转录因子2（RUNX2)、人骨形态发生蛋白2（BMP2）的mRNA表达，通过茜素红染色法检测钙结节形成数量，ALP染色法检测ALP的生成。通过转录组测序检测DGal组、DGal+GYY4137组两组细胞的差异表达基因，根据测序结果，qRTPCR对差异基因进行验证。应用Dickkopf相关蛋白1（dickkopf Wnt signaling pathway inhibitor 1，DKK1）抑制Wnt10b的表达后，检测各组衰老BMSCs的成骨分化能力。结果： DGal的最佳诱导浓度为30 g/L，GYY4137的最佳干预浓度为10 μmol/L，DGal组β半乳糖苷酶阳性细胞比例显著增加，衰老相关基因（P16、P21、P53）及衰老相关炎症因子（IL6、IL8、TNFα）mRNA的表达量显著升高（P＜005或P＜001），应用GYY4137干预后，以上细胞衰老相关指标显著降低（P＜005或P＜001）。在成骨分化过程中，DGal+GYY4137组ALP、OCN、RUNX2、BMP2的mRNA表达，钙结节阳性比例显著高于DGal组（P＜005或P＜001）；测序结果发现Wnt/βcatenin信号通路中的Wnt10b表达有显著差异，qRTPCR结果显示GYY4137可增加衰老细胞Wnt10b及其下游基因βcatenin的表达（P＜005或P＜001），与测序结果一致。应用100 μg/L DKK1抑制Wnt10b的表达后，GYY4137处理的衰老BMSCs成骨分化相关基因ALP、OCN、RUNX2、BMP2的mRNA表达明显降低（P＜005或P＜001）。结论： GYY4137可以缓解DGal诱导的BMSCs衰老进程，并且可能通过Wnt/βcantenin信号通路促进衰老BMSCs的成骨分化。

目的:基于网络药理学探讨黄芪白术药对治疗骨质疏松性骨折(osteoporotic fracture, OPF)的潜在作用机制。方法:应用中药系统药理学数据库及分析平台(TCMSP)筛选黄芪、白术的活性成分及作用靶点,检索与疾病靶点有关的GeneCards、OMIM、TTD数据库筛选OPF的作用靶点,进而筛选黄芪、白术与OPF的交集核心靶点,并运用Cytoscape 3.7.1软件构建化合物靶点疾病网络,基于DAVID数据库对靶点进行GO功能富集和KEGG通路富集分析。结果:基于TCMSP数据库筛选黄芪白术治疗OPF的活性成分19个和交集靶点115个；GO功能富集分析得到条目568个,其中生物过程条目433个、细胞组成条目43个、分子功能条目92个；KEGG通路富集分析得出条目111个,主要包括糖尿病并发症中的AGERAGE、IL-17、TNF、前列腺癌、Toll样受体、HIF-1、NF-κB等信号通路。结论:黄芪白术药对可能通过调控TNF、NF-κB、HIF-1等信号通路,发挥调控炎症反应以及破骨细胞和成骨细胞的内在平衡作用,从而对OPF产生治疗作用。

目的:探讨骨水泥分批灌注经皮椎体后凸成形术(percutaneous kyphoplasty,PKP)治疗伴有椎体后壁骨缺损的骨质疏松性椎体压缩骨折(osteoporotic vertebral compression fracture, OVCF)的临床效果。方法:回顾性分析我科2016年5月至2020年7月收治的伴有椎体后壁骨缺损的OVCF患者,符合纳入标准和排除标准的32例患者进行了骨水泥分批灌注PKP治疗,记录和比较患者术前及术后1个月、3个月时疼痛视觉模拟评分(visual analog score,VAS),Oswestry功能障碍指数(Oswestry disability index, ODI),伤椎Cobb角和伤椎高度,以及术后骨水泥渗漏和并发症的情况。结果:患者术后随访时VAS、ODI、伤椎Cobb角均显著低于术前(P＜0.05),而术后伤椎高度显著高于术前(P＜0.05)。术后1个月、3个月各指标间差异均无统计学意义(P＞0.05)。共发生骨水泥渗漏3例（9.38%）,无椎管内渗漏病例,未发生神经损伤、肺栓塞等手术并发症。结论:对于伴有椎体后壁骨缺损的OVCF,骨水泥分批灌注PKP是一种安全有效的手术方法,且能有效地减少骨水泥的渗漏。

目的:  探讨急性髓系白血病（acute myeloid leukemia，AML）患者骨髓标本中鼠双微粒体2（murine double minute 2，MDM2）环状RNA（circ-MDM2）表达的临床意义。方法：采用实时定量PCR检测92例AML患者和22例对照组的骨髓单个核细胞（bone marrow mononuclear cells，BMMNCs）中circ-MDM2表达水平。采用受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线评价circ-MDM2表达的诊断价值。分析circ-MDM2表达水平与AML患者临床参数的关系。使用Kaplan-Meier曲线分析circ-MDM2对总体生存时间和无白血病生存时间的影响。结果：与对照组相比，circ-MDM2在AML患者中明显升高（P＜0.05）。circ-MDM2诊断AML的ROC 曲线下面积为0.649，circ-MDM2表达水平可以区分AML患者与对照组（P=0.03）。circ-MDM2低表达患者CEBPA的突变率明显高于circ-MDM2高表达患者（P=0.039）。circ-MDM2高、低表达患者在总体生存时间与无白血病生存时间的差异均无统计学意义（P>0.05）。结论：circ-MDM2在AML患者中明显上调，并且可以作为诊断AML的潜在生物标志物。

目的:  探讨急性髓系白血病（acute myeloid leukemia，AML）患者骨髓标本中鼠双微粒体2（murine double minute 2，MDM2）环状RNA（circ-MDM2）表达的临床意义。方法：采用实时定量PCR检测92例AML患者和22例对照组的骨髓单个核细胞（bone marrow mononuclear cells，BMMNCs）中circ-MDM2表达水平。采用受试者工作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线评价circ-MDM2表达的诊断价值。分析circ-MDM2表达水平与AML患者临床参数的关系。使用Kaplan-Meier曲线分析circ-MDM2对总体生存时间和无白血病生存时间的影响。结果：与对照组相比，circ-MDM2在AML患者中明显升高（P＜0.05）。circ-MDM2诊断AML的ROC 曲线下面积为0.649，circ-MDM2表达水平可以区分AML患者与对照组（P=0.03）。circ-MDM2低表达患者CEBPA的突变率明显高于circ-MDM2高表达患者（P=0.039）。circ-MDM2高、低表达患者在总体生存时间与无白血病生存时间的差异均无统计学意义（P>0.05）。结论：circ-MDM2在AML患者中明显上调，并且可以作为诊断AML的潜在生物标志物。

目的:  探讨遗忘型轻度认知功能障碍(amnestic mild cognitive impairment，aMCI)患者齿状核静息态功能连接改变及其与认知功能的相关性。方法： 选取34例aMCI患者作为观察组，另选取34例同期健康老年人作为对照组。应用静息态功能磁共振成像(rs-fMRI)技术采集数据，比较两组双侧齿状核与全脑其他脑区功能连接差异;采用偏相关分析aMCI患者功能连接改变与临床量表评分及生物标志物之间的相关性。结果： 与对照组相比，观察组左侧齿状核与左侧颞叶及右侧丘脑，右侧齿状核与左颞上回以及右侧小脑后叶连接增强(AlphaSim矫正，P<0.05，体素数>100)。简易精神状态评分(MMSE)及言语流畅性评分(VFT)与aMCI患者左侧齿状核和右侧丘脑之间的功能连接值呈正相关(r=0.399，P=0.026；r=0.383，P=0.025)；右侧齿状核和左侧颞上回之间的功能连接值与听觉词语学习测验再认评分呈负相关(r=-0.552，P=0.001)，与磷酸化tau蛋白呈正相关(r=0.357，P=0.045)。结论： aMCI患者出现特定小脑皮层功能连接增强现象，且与认知功能量表评分及生物标志物相关。

目的:  探讨2型糖尿病（T2DM）患者平均动脉压（MAP）与臂踝脉搏波传导速度（BaPWV）的相关性。方法： 选取T2DM患者979例，应用电子血压计测量患者右上臂血压，计算MAP，采用三分位数法分为低MAP组（MAP＜92.4 mmHg，n=327），中MAP组（92.4 mmHg≤MAP＜102.4 mmHg，n=326），高MAP组（MAP≥102.4 mmHg，n=326）。应用欧姆龙动脉硬化检测仪测定BaPWV及踝肱指数。采用多元线性回归及Logistic回归模型分析MAP与BaPWV的相关性。绘制ROC曲线评估MAP对T2DM患者发生动脉硬化的预测价值。结果： T2DM患者随着MAP增加BaPWV逐渐升高（P＜0.01）。相关分析显示，T2DM患者MAP与年龄、体重指数、腰臀比、胰岛素抵抗指数、三酰甘油、BaPWV呈正相关。线性回归显示，在校正相关危险因素后，MAP与BaPWV仍呈正相关（P＜0.01）。Logistic回归分析显示，校正其他混杂因素后MAP与T2DM患者BaPWV独立相关（OR为1.160，95%CI: 1.132~1.188）。MAP预测T2DM患者发生动脉硬化的ROC曲线下面积为0.786（95%CI：0.759~0.811，P＜0.01），最佳临界值为94.4 mmHg（敏感度为75.0%，特异度为69.2%）。结论： MAP有望成为预测T2DM患者动脉硬化风险的简易实用的指标。

目的:  对伴有认知意识受损的遗忘型轻度认知功能障碍（amnestic mild cognitive impairment, aMCI）患者的自我参照网络（self-referential network, SRN）和脑脊液病理标志物β淀粉样蛋白（amyloid βprotein，Aβ），总Tau蛋白（total Tau，t-Tau）和磷酸化Tau蛋白（phosphorylated Tau，p-Tau）改变特征进行研究。方法: 共纳入51例aMCI患者，根据认知意识指数将其分为认知意识受损aMCI组（n=20）与认知意识保留aMCI 组（n=31）。两组患者均行静息态功能磁共振、腰椎穿刺、认知评估检查，采用独立成分分析方法提取SRN；用双样本t检验比较两组间SRN功能连接和脑脊液（Aβ，t-tau和p-tau）改变；用Pearson相关分析探讨认知意识指数与功能连接改变和脑脊液Aβ，t-tau和p-tau水平的关系。结果：  认知意识受损aMCI组较认知意识保留aMCI组在双侧内侧眶额叶皮层、左侧前扣带回和右侧直回显示出功能连接增强（AlphaSim 校正，P＜0.001，体素数＞17），两组间脑功能连接差异脑区信号值与认知意识指数呈负相关（r=-0.457，P＜0.001）。认知意识受损aMCI组较认知意识保留aMCI组脑脊液Aβ水平明显降低（P＜0.01），脑脊液ttau水平（P＜0.001）和 ptau水平（P＜0.001）显著升高，Aβ水平与认知意识指数呈正相关（r=0.331，P =0.025），t-tau、p-tau水平与认知意识指数呈负相关（r=-0.534，-0.508，P均＜0.001）。结论： SRN是认知意识的神经影像基础；伴有认知意识受损的aMCI患者存在SRN的功能连接受损和更严重的阿尔茨海默病病理标志物的沉积。

目的:  探讨去铁胺预处理对甲基汞毒性作用的影响及其潜在的机制。方法: 选用大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞与大鼠肝BRL细胞，对照组用含10%胎牛血清的高糖培养基培养0.5 h，甲基汞组用不同浓度甲基汞(1.0、2.5、5.0、10.0 μmol/L)处理0.5 h，MTT法检测细胞活力，免疫印迹法检测谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4，GPx4)蛋白表达，筛选最适浓度甲基汞。另取PC12细胞与BRL细胞，对照组用含10%胎牛血清的高糖培养基培养6.5 h，去铁胺+甲基汞组分别用0、50、100、200、400 μmol/L去铁胺预处理6 h，再用10.0 μmol/L甲基汞处理0.5 h，免疫印迹法检测GPx4及缺氧诱导因子-1α (hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)蛋白表达，MTT法检测细胞活力。结果：  与对照组相比，10.0 μmol/L甲基汞组两种细胞活力降低最显著，以此浓度进行后续实验；随着甲基汞浓度逐渐增加，两种细胞中GPx4表达逐渐降低。与0 μmol/L去铁胺+甲基汞组比较，随着去铁胺浓度增加，两种细胞中GPx4和HIF-1α蛋白表达逐渐增加；400 μmol/L去铁胺+甲基汞组PC12细胞活力明显增加，200 μmol/L去铁胺+甲基汞组BRL细胞活力明显增加。结论： 去铁胺可拮抗甲基汞致细胞的铁死亡，可能与上调HIF-1α及铁死亡关键调控因子GPx4表达相关。

目的:  研究长链非编码RNA（long noncoding RNA，lncRNA）PAPPA-AS1在人肺腺癌细胞铂类耐药中的作用，并初步探讨其可能的调控机制。方法: 采用RNA测序（RNA-seq）技术检测人肺腺癌细胞A549及其铂类耐药细胞中lncRNA和mRNA的差异表达谱；qRT-PCR检测lncRNA PAPPA-AS1在A549/DDP和A549/NDP细胞中的表达水平；利用siRNA技术下调铂类耐药人肺癌细胞中PAPPA-AS1的表达，CCK-8实验检测肺腺癌细胞对铂类药物的敏感性；克隆形成实验检测细胞的增殖能力；流式细胞术检测细胞凋亡分布；蛋白质印迹法检测Cleaved Caspase-3、Cleaved Caspase-9、p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白在A549/DDP和A549/NDP细胞中的表达水平。 结果：  与亲代敏感细胞A549相比，lncRNA PAPPA-AS1在A549/DDP和A549/NDP细胞中呈高表达；与对照组比较，si-PAPPA-AS1组的肺腺癌细胞对铂类药物的敏感性增强，细胞增殖活力下降，细胞凋亡率增加（P均<0.05）；与对照组比较，si-PAPPA-AS1组的细胞中Cleaved Caspase-3和Cleaved Caspase-9蛋白表达明显升高，磷酸化PI3K、Akt和mTOR蛋白表达明显降低。结论： 下调PAPPA-AS1可以通过抑制PI3K/Akt信号通路逆转肺腺癌细胞对铂类药物的抵抗性。

目的:  制备一种具有化疗、光热和光动力联合治疗效果的纳米粒，研究其体外逆转肿瘤多药耐药的效果。方法: 利用D-α-生育酚琥珀酸酯（D-α-tocopherol succinate，TOS）、人血清白蛋白（human serum albumin，HSA）、吲哚菁绿（indocyanine green，ICG）、多柔比星（doxorubicin，DOX）之间的内在相互作用力，自组装形成负载DOX和ICG的人血清白蛋白生育酚纳米粒（DOX-HIT-NPs），对制备的DOX-HIT-NPs的形态、粒径等进行表征；选用乳腺癌耐药细胞株（MCF-7/ADR）观察DOX-HIT-NPs的细胞摄取，用荧光显微镜观察MCF-7/ADR细胞内活性氧（reactive oxygen species，ROS）的水平，通过CCK8实验考察DOX-HIT-NPs的细胞毒性。结果：  制备的DOX-HIT-NPs近似球形，粒径约278.8 nm，具有良好的光热效应；DOX-HIT-NPs可以促进MCF-7/ADR细胞对DOX的摄取；近红外光照下DOX-HIT-NPs可以诱导MCF-7/ADR细胞产生活性氧，并对MCF-7/ADR细胞的增殖具有显著的抑制效果。结论： 成功获得DOX-HIT-NPs，DOX-HIT-NPs在体外具有逆转肿瘤多药耐药的效果。

目的:  探讨中性粒细胞明胶酶相关脂质运载蛋白（NGAL）、尾加压素Ⅱ和胱抑素C联合检测对早期糖尿病肾病（DKD）的诊断价值。方法: 选取我院住院T2DM患者60例，以24 h尿微量白蛋白（mAlb）含量分为单纯T2DM组（mAlb<30 mg/24 h）和早期DKD组(mAlb在30～300 mg/24 h）。选择同期健康体检者30例作为健康对照组。AU5800生化仪检测各组空腹血清NGAL、胱抑素C和尿肌酐，免疫比浊法检测血清尾加压素Ⅱ和尿mAlb。结果：  与健康对照组相比较，单纯T2DM组估算肾小球滤过率（eGFR）、尿白蛋白与肌酐比值（UACR）、NGAL、尾加压素Ⅱ和胱抑素C差异无统计意义；早期DKD组除eGFR显著降低外，UACR、NGAL、尾加压素Ⅱ和胱抑素C均显著高于单纯T2DM组和健康对照组（P均<0.05）。早期DKD组中，NGAL、尾加压素Ⅱ和胱抑素C含量均与UACR呈正相关（r值分别为0.651、0.682、0.723， P均<0.05）。血清NGAL、尾加压素Ⅱ和胱抑素C联合检测DKD的ROC曲线下面积、敏感性和特异性分别为0.937、92.40%和86.30%，显著高于单项检测的诊断价值（P<0.05）。结论： 在DKD早期诊断中，血清NGAL、尾加压素Ⅱ和胱抑素C联合检测优于单项检测。