目的： 基于生物信息学探讨铁死亡（ferroptosis）参与2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）患者发生动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）的枢纽基因和潜在机制。方法： 从GEO数据库中获取数据集GSE20966（T2DM）和GSE43292（AS），利用Limma R包鉴定差异表达基因（differentially expressed genes，DEGs），绘制热图和火山图，交叉分析获得与2种疾病相关的DEGs；进行GO和KEGG富集分析探寻DEGs的生物功能。交联从FerrDb数据库获取的铁死亡相关基因（ferroptosisrelated genes,FRGs），利用LASSO回归和随机森林分析筛选枢纽基因，使用ROC曲线以及验证集GSE76895（T2DM）和GSE28829（AS）进行验证。最后绘制基因miRNA网络分析枢纽基因的作用机制。结果： 在T2DM和AS数据集中共鉴定出606个相关DEGs。与FRGs交联获得了20个潜在相关基因。细胞周期蛋白依赖性激酶抑制因子1A（cyclin-depedent kinase inhibitors 1A，CDKN1A）、聚腺苷二磷酸核糖聚合酶8（poly ADP-ribose polymerase 8，PARP8）、磷脂酰乙醇胺结合蛋白1（phosphatidylethanolamine binding protein 1，PEBP1）和孕酮受体膜成分1（progesterone receptor membrane component 1，PGRMC1）是铁死亡参与T2DM患者AS的枢纽基因。4个基因在数据集GSE20966和GSE43292中ROC曲线下面积（area under the curve，AUC）均大于0.7，具有诊断价值。PEBP1和PGRMC1在验证集GSE76895和GSE28829中显著下调。此外，13个miRNAs与4个枢纽基因密切相关。结论： CDKN1A、PARP8、PEBP1和PGRMC1通过铁死亡参与T2DM患者AS，有望成为新的治疗靶点。

目的： 探究人脐带间充质干细胞来源小细胞外囊泡（hucMSCs derived small extracellular vesicles,hucMSC-sEVs）对糖尿病肾病（diabetic kidney disease,DKD）大鼠肾脏损伤的修复作用及可能机制。方法： 分离培养hucMSCs并从培养上清液中提取hucMSC-sEVs。高脂联合链脲佐菌素构建DKD大鼠模型，将大鼠随机分为对照组、DKD组和hucMSC-sEVs组，每组6只，hucMSC-sEVs组在造模8周后进行尾静脉注射hucMSC-sEVs，24周后收集肾组织。肾脏组织切片进行HE染色、过碘酸雪夫（PAS）染色和天狼星红染色，观察大鼠肾组织病理学改变和纤维化样改变；蛋白质印迹检测肾组织中凋亡相关蛋白Bcl-2和Bax表达；免疫组织化学染色、免疫荧光染色和蛋白质印迹检测大鼠肾组织血小板反应蛋白1（THBS1）及其受体CD36和CD47的表达水平。结果： 与对照组相比，DKD组大鼠肾脏发生明显的病理改变，如肾小球基底膜增厚和系膜增生，肾小管扩张伴有空泡变性，间质发生明显纤维化改变伴炎症细胞浸润，肾组织中Bax表达明显增加（P<0.05），Bcl-2表达显著下降（P<0.01），THBS1及其受体CD36和CD47的表达水平明显增加（P<0.001）；与DKD组相比，hucMSC-sEVs组大鼠肾组织病理损伤和纤维化水平明显缓解，Bax表达显著下降（P<0.01），Bcl-2表达显著增加（P<0.01），肾脏中THBS1及其受体CD36和CD47的表达水平显著降低（P<0.001）。结论： HucMSC-sEVs可明显减轻DKD肾组织损伤发挥保护作用，其机制可能与靶向抑制THBS1的表达有关。

目的： 探究CXC趋化因子配体14（CXCL14）对糖尿病动脉粥样硬化（atherosclerosis，AS）小鼠脂肪组织焦亡及AS斑块的影响。方法： ① 腹腔注射链脲佐菌素诱导糖尿病ApoE^-/-小鼠，对糖尿病小鼠高脂喂养20周，构建糖尿病AS模型（模型组），对照小鼠仅高脂饮食（AS组）；② 在糖尿病小鼠后肢内侧皮下注射抗CXCL14短肽（抗CXCL14组），对照糖尿病小鼠仅皮下注射生理盐水；③ 在糖尿病小鼠后腹股沟皮下脂肪组织原位注射腺相关病毒(AAV)以抑制消化道皮肤素（GSDMD）介导的细胞焦亡，分为：AAV-shscramble组、AAV-shGSDMD组、抗CXCL14+AAV-shscramble组、抗CXCL14+AAV-shGSDMD组。各组小鼠高脂饮食饲养20周后，麻醉下收集小鼠血清，应用生化试剂盒检测小鼠血脂水平（总胆固醇、三酰甘油、LDL-C、HDL-C）。处死小鼠，取附睾脂肪组织进行电镜扫描及HE染色观察脂肪细胞变化；利用qRT-PCR技术分析附睾脂肪组织焦亡相关因子GSDMD、天冬氨酸蛋白水解酶1（Caspase-1）、NLR家族吡啶结构域蛋白3（NLRP3）炎症小体、白介素1β（IL-1β）和炎症因子白介素-6（IL-6）的变化。分离提取小鼠主动脉，通过HE染色和血管大体油红O染色观察主动脉AS斑块的相对面积。结果： 与AS组相比，模型组小鼠附睾脂肪组织中的脂肪细胞肥大并数量减少（P<0.01），主动脉AS斑块面积显著增加，总胆固醇、三酰甘油、LDL-C水平明显升高，HDL-C明显降低；附睾脂肪组织的焦亡相关因子和IL-6水平明显升高（P<0.05），表明糖尿病促进小鼠AS斑块与脂肪组织焦亡。注射抗CXCL14短肽可以减少主动脉斑块面积，改善血脂水平，并抑制脂肪组织焦亡，脂肪细胞数量增多。GSDMD敲减后，附睾脂肪组织中脂肪细胞数量增多，主动脉AS斑块面积减少；然而注射抗CXCL14免疫肽后，AAV-shGSDMD组AS斑块面积变化不显著。结论： 抗CXCL14可以减轻脂肪组织焦亡并缓解糖尿病AS的发展。

目的： 利用网络药理学和分子对接技术分析“茵陈-玉竹”药对治疗糖尿病肾病的机制。方法： 通过中药系统药理学数据库及分析平台(TCMSP)、中医药百科全书(ETCM)、中医药分子机制生物信息学注释数据库(BATMAN-TCM)检索“茵陈-玉竹”药对的主要化学成分，通过药物靶点数据库(TTD)、人类在线孟德尔遗传(OMIM)数据库、DisGeNET、GeneCards等数据库收集糖尿病肾病的疾病靶点，进而筛选茵陈、玉竹与糖尿病肾病的交集核心靶点。利用Cytoscape 3.7.2软件构建“化合物-靶点-疾病网络”，同时基于DAVID数据库对靶点进行GO功能富集和KEGG通路富集分析。结果： 获取“茵陈-玉竹”药对主要活性成分31个，作用靶点351个，糖尿病肾病相关基因2 911个，交集基因185个，其中起关键作用的活性成分为槲皮素、滨蒿内酯、莨菪亭、D-香芹酮和异鼠李素；构建可视化PPI网络得到185个节点，851条边，平均度值9.2，获得前列腺素内过氧化物酶2(PTGS2)、核因子κB1(NFKB1)、丝裂原活化蛋白激酶1(MAPK1)、MAPK3、MAPK14等“茵陈-玉竹”药对治疗糖尿病肾病的关键靶点。GO富集分析获得1 181条相关通路，KEGG通路富集获得180条信号通路。结论： “茵陈-玉竹”药对可能通过调控磷脂酰肌醇3激酶苏氨酸蛋白激酶(PI3K-Akt)、MAPK、糖基化终末产物糖基化终产物受体(AGE-RAGE)等信号通路，抑制各种炎症反应与氧化应激，调节异常代谢，从而对糖尿病肾病产生治疗作用。

       指南对中医临床开展标准化诊疗具有里程碑的意义，糖尿病肾病作为糖尿病的常见并发症，当前缺少与之相关的全面、规范且标准化的中医诊疗指南。本研究通过对既往发布的糖尿病肾病中医诊疗指南进行梳理，分析指南内容并提出建议，以期今后制定糖尿病肾病的中医诊疗指南能进一步凸显中医特色、提升方法学质量，为临床实践提供更多参考依据。

目的： 探究去势抵抗性前列腺癌（castration-resistant prostate cancer，CRPC）的肿瘤微环境中相关信号分子，并分析其与肿瘤发生发展之间的关系。方法： 通过基因表达综合数据库（Gene Expression Omnibus，GEO）中CRPC患者的单细胞RNA测序（scRNA-seq）数据（GSE137829），分析CRPC肿瘤微环境的主要组成成分；通过CellPhoneDB分析微环境中不同细胞间的相互作用，重点揭示肿瘤相关成纤维细胞（cancer-associated fibroblasts,CAFs）与恶性上皮细胞之间的联系；应用CellChat分析CAFs与恶性上皮细胞通讯相关的信号分子，结合肿瘤基因组图谱前列腺癌（TCGAPRAD）的数据，寻找与CRPC患者预后密切相关的信号分子。使用siRNA在CRPC细胞中敲低相关信号分子Delta样经典Notch配体3（DLL3），并通过实时荧光定量PCR、蛋白质印迹实验验证敲低效率。通过CCK8法、EdU实验以及Transwell和含有基质胶的Transwell实验，探究DLL3对CRPC细胞增殖、迁移、侵袭等生物学行为的影响。单基因差异分析以及过表征富集分析（ORA）、基因集富集分析（GSEA）寻找DLL3相关差异表达基因富集的通路。结果： 单细胞转录组测序结果表明，CRPC肿瘤微环境的主要细胞组成包括恶性上皮细胞、CAFs以及免疫细胞等。CAFs与恶性上皮细胞之间通过通讯相关信号分子相互作用实现紧密的通讯，共筛选出CAFs与恶性上皮细胞通讯密切相关的信号分子63个；单因素Cox回归分析显示关键信号分子肿瘤坏死因子相关配体超家族成员12（TNFSF12）以及DLL3转录本的表达与CRPC患者预后显著相关，其中DLL3高表达与CRPC患者不良预后显著相关。体外实验结果表明，敲低DLL3显著抑制CRPC细胞的生长、增殖、迁移和侵袭能力。KEGG和GSEA富集分析表明，DLL3相关差异表达基因在代谢相关通路中显著富集。结论： 肿瘤微环境中CAFs与恶性上皮细胞之间通过细胞间通讯相关信号分子实现紧密通讯，其中DLL3的表达与患者预后呈负相关，且影响CRPC细胞生物学行为，DLL3或是人CRPC恶性进展的关键信号分子。

目的： 研究邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯［di-(2-ethylhexyl) phthalate,DEHP］对斑马鱼胚胎发育的影响及潜在的分子机制。方法： 将斑马鱼胚胎随机分为5组，分别为空白对照组、二甲基亚砜组以及8、40、200 μg/L DEHP组，暴露至96 hpf，记录死亡率、孵化率、畸形率、心率、体长和胚胎自主运动次数等发育指标；采用酶学分析检测仔鱼体内超氧化物歧化酶(SOD)活力、谷胱甘肽过氧化氢酶(GPx)活力及丙二醛含量；采用实时荧光定量PCR法测定细胞凋亡、葡萄糖转运以及蛋白质、脂肪酸和糖原合成相关mRNA表达。结果： (1) 与对照组相比，8 μg/L DEHP组斑马鱼胚胎/仔鱼死亡率显著增加(P＜0.01)，仔鱼体长显著降低(P＜0.05)；40、200 μg/L DEHP组斑马鱼胚胎/仔鱼死亡率和畸形率显著增加(P＜0.01)，孵化率、心率、体长以及胚胎自主运动次数明显降低(P＜0.05或P＜0.01)。(2) 与对照组相比，8 μg/L DEHP组斑马鱼仔鱼体内GPx活力显著降低(P＜005)；40、200 μg/L DEHP组斑马鱼仔鱼体内SOD、GPx活力明显降低且丙二醛含量显著增加(P＜0.01)。(3) 与对照组相比，8 μg/L DEHP组葡萄糖转运信号通路中Pi3k mRNA表达显著上调(P＜0.01)；40、200 μg/L DEHP组凋亡信号通路中Bax/Bcl-2、Caspase-3和Ras mRNA表达显著上调(P＜0.01)，葡萄糖转运信号通路中Akt和Pi3k mRNA表达显著上调(P＜0.01)，Erk1/2 mRNA表达显著下调(P＜0.05或P＜0.01)，蛋白质、脂肪酸和糖原合成信号通路中Mtor、Gsk-3α和Gsk-3β mRNA表达显著上调(P＜0.05或P＜0.01)。结论： DEHP可能通过诱导细胞凋亡，改变代谢相关mRNA表达，造成氧化损伤，从而影响斑马鱼胚胎的生长发育，产生发育毒性。

目的： 探讨大鼠骨髓间充质干细胞来源的外泌体(bone marrow mesenchymal stem cells derived exosomes,BMSCs-Exos)对脂多糖（LPS）诱导的急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞NR8383 M1/M2极化的影响及其潜在的机制。方法： 分离SD大鼠骨髓间充质干细胞并制备BMSCs-Exos。分别用01、1 mg/mL BMSCs-Exos预处理NR8383细胞1 h，再用1 μg/mL LPS诱导48 h，采用ELISA和蛋白免疫印迹分别检测细胞上清液中炎性因子含量以及细胞内极化标志物蛋白表达。将NR8383细胞单独培养或与BMSCs共培养，经20 μmol/L外泌体抑制剂GW4869处理并予以1 μg/mL LPS诱导48 h，采用实时荧光定量PCR和蛋白免疫印迹分别检测细胞内miR-212-5p以及IL-4Rα和p-STAT6蛋白相对表达。生物信息学预测miR-212-5p与IL-4Rα mRNA结合位点并通过荧光素酶实验验证。结果： 成功制备BMSCs-Exos。ELISA和免疫印迹结果表明，1 μg/mL LPS诱导48 h可促进NR8383细胞分泌炎性因子(TNF-α，IL-1β和IL-10)及M1极化，BMSCs-Exos预处理可明显降低LPS诱导的NR8383细胞培养上清液中炎性因子TNF-α和IL-1β含量，增加抗炎因子IL-10含量，同时抑制细胞M1极化并促进其M2极化，且1 mg/mL BMSCs-Exos明显强于0.1 mg/mL BMSCs-Exos。细胞共培养实验结果表明，1 μg/mL LPS诱导48 h可增加NR8383细胞中miR-212-5p相对表达量以及IL-4Rα和p-STAT6蛋白表达，与BMSCs共培养可有效抑制LPS对上述指标的影响，但BMSCs的作用可被GW4869阻断。荧光素酶实验结果显示，miR-212-5p可与IL-4Rα mRNA 3′UTR结合并促进其蛋白表达。结论： BMSCs-Exos可能通过miR-212-5p/IL-4Rα/STAT6通路抑制LPS诱导的急性肺损伤大鼠肺泡巨噬细胞NR8383的M1极化并促进其M2极化。

目的： 基于生物信息学方法构建预测前列腺癌（PCa）骨转移的预后风险模型，探究风险评分对预后和免疫浸润的影响。方法： 从基因表达公共数据库(GEO）下载PCa患者的临床资料和微阵列表达数据，分子特征数据库(MSigDB)下载骨形成蛋白（BMP）通路相关基因。通过差异分析筛选出PCa骨转移样本与原发性PCa样本的差异表达基因（differential expression genes，DEGs），与BMP通路相关基因取交集得到BMP相关DEGs，通过LASSO回归分析筛选风险基因构建预后风险模型，多因素Cox回归分析筛选PCa独立预后因素。根据风险模型计算患者的风险评分，并以中位值分为高危组和低危组，识别DEGs进行功能富集分析，比较高危、低危组间的免疫浸润差异。结果： 从3 055个PCa骨转移样本中的DEGs与BMP相关基因集取交集后得到13个BMP相关DEGs，通过LASSO回归筛选出4个基因标签构建预后风险模型，其中分泌型卷曲相关蛋白2（SFRP2）、内皮糖蛋白（ENG）、卵泡素样蛋白1（FSTL1）是风险基因，脊索素样蛋白1（CHRDL1）是保护基因。根据风险评分中位值（7.3）将PCa患者分为高危和低危组，Kaplan-Meier分析显示高危组患者无转移生存期及无生化复发生存期明显低于低危组患者。高危组患者更容易发生骨转移和生化复发，且风险评分与前列腺特异性抗原（PSA）值、Gleason评分及T分期呈正相关。高危组上调基因主要参与WNT/BMP信号通路的激活，明显富集在上皮细胞增殖、细胞外基质等生物过程；GSEA分析显示，差异基因在间充质转化、炎症反应、血管生成以及多个肿瘤转移基因集中上调。免疫浸润分析显示高危组患者拥有更高的免疫细胞浸润程度、肿瘤相关成纤维细胞（CAFs）、巨噬细胞、Estimate评分、基质评分及免疫评分，而肿瘤纯度低于低危组。结论： 基于LASSO回归分析构建的BMP相关DEGs预后风险模型能够有效预测PCa骨转移发生，且高风险评分与PCa患者预后和免疫浸润密切相关。

目的： 分析血清白介素(interleukin,IL)-17水平对醋酸炔诺酮缓解子宫内膜异位症(endometriosis，EMS)患者疼痛效果的影响。方法： 选择2020年10月至2022年10月于镇江市第四人民医院妇科就诊的EMS患者105例(EMS组)，另选择同期健康体检者80例(对照组)，采用ELISA法检测两组血清IL-17水平；采用视觉模拟评分法(Visual Analogue Scale，VAS)对EMS组行疼痛评分，并分析血清IL-17水平与r-AFS分期、VAS疼痛评分的相关性。EMS患者采用醋酸炔诺酮治疗1个月，根据治疗前和治疗后VAS疼痛评分，将其分为有效组(n=65)和无效组(n=40)，采用Logistic回归分析治疗前血清IL-17水平对醋酸炔诺酮缓解EMS疼痛疗效的影响，并绘制ROC曲线。结果： 治疗前，EMS组血清IL-17水平显著高于对照组(P<0.05)，且血清IL-17水平与r-AFS分期呈正相关(r=0.764，P<0.05)，与VAS疼痛评分呈弱相关(r=0.251，P<0.05)；有效组治疗前血清IL-17水平显著低于无效组(P<0.05)；治疗前血清IL-17水平升高是EMS患者醋酸炔诺酮缓解疼痛有效的危险因素(β=0.560，OR=1.751，P<0.05)，ROC曲线下面积为0.814，敏感度为84.62%，特异度为72.50%，最佳截断值为62.36 pg/mL。结论： 血清IL-17水平与EMS发生发展相关，可良好预测醋酸炔诺酮对EMS患者疼痛症状的疗效。

目的： 研究乙磺酸尼达尼布（nintedanib ethanesulfonate，NE）雾化吸入制剂的处方工艺，并对其进行体内外评价。方法： 通过筛选抗氧剂、渗透压调节剂、pH等确定其最优处方；测定NE雾化吸入制剂的雾化动态粒径；通过液相色谱测定NE雾化吸入制剂的体内药代动力学；以肺功能、羟脯氨酸（hydroxyproline,HYP）、肿瘤坏死因子-α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）、转化生长因子-β1（transforming growth factor-β1,TGF-β1）等为指标评价体内治疗效果。结果： 确定NE吸入溶液的最终处方为NE 10 mg，亚硫酸氢钠4 mg，丙二醇50 mg，水2 mL，盐酸调pH至4.0；NE雾化吸入制剂的平均粒径约为3.3 μm；SD大鼠体内药代动力学结果显示，NE吸入溶液的体内消除半衰期为5.27 h，生物利用度显著提高，达到63.71%；吸入制剂后肺纤维化模型小鼠肺功能各项参数（气管收缩参数、50%潮气量呼气流量和呼吸速率等）及肺干/湿重比、HYP、TNF-α等指标均有显著改善。结论： NE雾化吸入制剂可有效改善肺功能参数，提高其生物利用度。

目的： 构建阿苯达唑自微乳给药系统（albendazole-loaded self microemulsion drug delivery system，ABZ-SMEDDS），提高难溶性药物的溶出度和口服生物利用度。方法： 通过伪三相图的建立优化自乳化微乳的处方组成，测定其粒径、载药量、包封率以及微观形态，并考察其体外释药效果和在结肠腺癌Caco-2细胞模型上的细胞毒性及细胞摄取情况，最后对ABZ-SMEDDS的大鼠口服生物利用度进行研究。结果： ABZ-SMEDDS最优处方组成为丁香油、聚氧乙烯氢化蓖麻油RH40和聚乙二醇400，其质量比为0.20∶0.64∶0.16。最优处方制备的ABZSMEDDS粒径为（52.14±1.82）nm，多分散指数为0.084±0.006，载药量为（36.60±1.20）mg/g，包封率为（98.12±2.20）%，透射电镜显示微乳呈圆球状。体外释放与细胞实验结果显示，相比于原料药，ABZ-SMEDDS在不同溶出介质中均能显著提高药物溶出度并促进药物的跨膜吸收。体内药动学结果显示，与原料药相比，ABZ-SMEDDS的相对生物利用度提高至151.95%。结论： 制备的ABZ-SMEDDS能够较好地提高难溶性药物的溶出度和口服生物利用度。