目的： 基于生物信息学方法分析尼曼匹克C1型类似蛋白1(NiemannPick C1 like1,NPC1L1)mRNA在结肠癌中的表达及其临床价值。方法： 收集TIMER20、TCGA、GEO公共数据库中结肠癌患者的NPC1L1 mRNA数据、临床病理特征数据及生存数据，比较NPC1L1 mRNA在结肠癌组织与癌旁组织中的差异；根据NPC1L1 mRNA最佳截断值将结肠癌患者分为NPC1L1 mRNA高表达组和低表达组，结合临床数据分析两组临床病理特征差异。采用Kaplan-Meier生存曲线、Log-rank检验分析NPC1L1 mRNA高表达组与低表达组患者5年生存率差异；Cox回归分析结肠癌患者预后的影响因素；通过R软件Cluster Profiler包输出GSEA图。选择两株人结肠癌细系HCT116、SW620进行细胞培养、传代，分别分为阴性对照组、si-NPC1L1-1、si-NPC1L1-2、si-NPC1L1-3、si-NPC1L1-4组，用对应小干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)进行瞬时转染，采用蛋白质印迹法在蛋白质水平进行验证，筛选敲减效率最高的序列进行后续实验；将HCT116、SW620细胞分别分为si-NC组(对照)和siNPC1L1组(敲减si-NPC1L1)，采用平板克隆形成实验细胞克隆形成数。结果： 结肠癌组织中NPC1L1 mRNA相对表达显著高于癌旁组织(P＜0.001)。NPC1L1 mRNA高表达与结肠癌患者淋巴结转移显著相关(χ2=2.126，P=0.034)。ROC曲线曲线下面积为0.785(95%CI：0.728~0.839)。NPC1L1 mRNA高表达组5年生存率显著低于低表达组(P=0.003)；单因素及多因素Cox回归分析结果显示，NPC1L1 mRNA可能为影响结肠癌患者预后的独立因素(P＜0.05)。GSEA结果显示，NPC1L1 mRNA高表达组含有包括Wnt信号通路在内的10条信号通路(P＜0.05)。细胞实验结果显示，si-NPC1L1-3序列对HCT116、SW620细胞中NPC1L1敲减效率最高，达65%以上；平板克隆形成实验结果显示，si-NPC1L1组HCT116、SW620细胞克隆形成数显著低于阴性对照组(P＜0.001)。结论： NPC1L1 mRNA在结肠癌中呈高表达，且与结肠癌患者预后呈负相关，可作为结肠癌诊治的生物学标志物。

目的： 探究hsa_circ_0076987在胃癌细胞和胃癌血浆外泌体中的表达情况，研究其对胃癌细胞生物学功能的影响。方法： 通过circRNA芯片技术，检测6对胃癌患者与健康体检者血浆外泌体中circRNA的表达情况；采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测hsa_circ_0076987在胃癌细胞和血浆外泌体中的表达情况，并结合临床病理资料，分析其临床相关性；采用受试者工作特征(ROC)曲线分析hsa_circ_0076987对胃癌的诊断价值；采用过表达质粒在胃癌细胞中过表达hsa_circ_0076987，通过CCK-8和克隆形成实验检测胃癌细胞增殖能力变化；Transwell迁移和侵袭实验检测胃癌细胞迁移与侵袭能力变化。结果： qRT-PCR结果显示，hsa_circ_0076987在胃癌细胞和胃癌血浆外泌体中低表达(P均<0.01)，且与肿瘤神经浸润相关(P<0.05)；ROC曲线分析显示，hsa_circ_0076987曲线下面积(AUC)为0.709，灵敏度为0.606，特异度为0.697，95%CI：0.585～0.833(P<0.05)；过表达hsa_circ_0076987可以抑制胃癌细胞的增殖、迁移与侵袭能力。结论： hsa_circ_0076987在胃癌细胞及血浆外泌体中低表达，有望成为胃癌诊断的新型标志物与治疗靶点。

目的： 探究钾离子通道蛋白钾电压门控通道亚家族D成员1(potassium voltagegated channel subfamily D member 1，KCND1)在胰腺癌放射抵抗中的作用及其潜在机制。方法： 体外培养人胰腺癌PANC1细胞系，将其分为对照组(不照射)和X线照射组(8 Gy)，照射48 h，采用转录组测序(RNA-seq)和实时荧光定量PCR检测细胞中钾离子通道相关mRNA表达水平；采用免疫荧光检测KCND1蛋白表达水平。利用CRISPR/Cas9技术敲除PANC1细胞中KCND1，将细胞分为sgControl、sgKCND1、sgControl+X线照射(8 Gy)、sgKCND1+X线照射(8 Gy)组，照射48 h，采用蛋白免疫印迹检测细胞内caspase-3和Bax蛋白表达；采用流式细胞术检测细胞内凋亡和活性氧水平；采用蛋白质免疫印迹和免疫荧光技术检测E钙黏蛋白和N钙黏蛋白表达水平；采用划痕迁移实验检测细胞迁移能力。取24只6~8周龄C57BL/6小鼠，于右侧背部皮下接种小鼠胰腺癌PANC02细胞，2周后随机分为4组，分别为对照组、X线照射组(5 Gy)、丙米嗪组(20 mg/kg)和X线照射(5 Gy)+丙米嗪组(20 mg/kg)，每组6只；检测小鼠瘤体体积并比较；采用蛋白免疫印迹检测小鼠皮下瘤组织中抗凋亡蛋白和促凋亡蛋白以及E-钙黏蛋白和N-钙黏蛋白表达水平。结果： 与对照组相比，X线照射组细胞钾离子通道KCNN4、KCND1、KCNA7、KCNA5、KCNMA1、KCNJ14等mRNA表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01)，其中KCND1 mRNA最显著。与X线照射组相比，sgKCND1+X线照射组caspase-3和Bax蛋白表达水平显著升高(P<0.05或P<0.01)，细胞凋亡比例明显升高(P<0.05或P<0.01)，N-钙黏蛋白表达水平显著降低(P<0.01)，E-钙黏蛋白表达水平明显升高(P<0.05)，细胞划痕愈合率明显降低(P<0.01)。与X线照射组相比，丙米嗪+X线照射组皮下瘤体积显著减小，肿瘤重量明显减少(P<0.05)。蛋白免疫印迹结果显示，与X线照射组相比，X线照射+丙米嗪组抗凋亡蛋白Bcl-2表达水平显著降低(P<0.05)，而促凋亡蛋白切割型caspase-3和Bax表达量则显著升高(P<0.05)；此外，E-钙黏蛋白表达水平显著升高(P<0.01)，N-钙黏蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论： 钾离子通道KCND1可能通过促进胰腺癌细胞上皮间充质转化和凋亡抵抗特性，从而导致胰腺癌产生放射抵抗。

胰腺导管腺癌（pancreatic ductal adenocarcinoma，PDAC）是世界上最致命和最具侵袭性的癌症之一，通常确诊时已进入晚期。对于晚期胰腺癌，化疗仍为标准治疗方法，但其效果常受限于严重的副作用和高度的耐药性。尽管近十年来免疫疗法迅速发展，但PDAC对免疫治疗的反应依然不理想，主要归结于其高度异质的表型、耐药性及免疫抑制性肿瘤微环境。胰腺癌的肿瘤微环境是一个由多种细胞类型和分子组成的复杂生态系统，其中肿瘤细胞、免疫细胞、基质细胞和血管内皮细胞密切相互作用。肿瘤细胞通过分泌细胞因子和生长因子，招募并影响免疫细胞（如巨噬细胞、T细胞、B细胞、树突状细胞等）以及基质细胞（如成纤维细胞和星形胶质细胞）。这些细胞间的相互作用不仅促进肿瘤的生长、侵袭和转移，还可能导致免疫逃逸和耐药性。从免疫抑制性微环境的视角出发，PDAC的预后不良通常伴随大量肿瘤相关巨噬细胞（tumorassociated macrophages，TAMs）的浸润，这些TAMs在肿瘤发生、进展及化疗耐药性中扮演关键角色。本文通过综述当前的研究成果，系统分析巨噬细胞在PDAC进展中的互作机制及其影响。

目的： 探讨雷公藤甲素对小鼠血睾屏障的损伤效应及分子机制。方法： 选用20~25 g健康雄性C57BL/6小鼠9只，随机分为对照组、雷公藤甲素低剂量给药组（0.2 mg/kg）和高剂量给药组（0.5 mg/kg），每组3只。持续给药28 d后，观察不同剂量雷公藤甲素干预后小鼠体重、睾丸体积及组织形态学改变，比较三组小鼠睾体比、生殖细胞凋亡水平、血睾屏障相关蛋白表达量及血睾屏障渗漏程度。结果： 与对照组相比，雷公藤甲素给药组小鼠体重涨幅显著降低，睾丸重量、睾体比显著下降(P均<0.01)；HE染色显示雷公藤甲素给药组小鼠曲细精管管腔生殖细胞丢失，管腔结构出现空泡化；附睾精子数量减少，高剂量给药物组小鼠附睾精子数量进一步降低，可见大量坏死生殖细胞；TUNEL结果显示雷公藤甲素给药组小鼠曲细精管内细胞凋亡显著增加（P均<0.01）；蛋白质印迹实验显示雷公藤甲素给药组小鼠血睾屏障相关蛋白（上皮钙黏蛋白、闭合蛋白、β-连环蛋白、血管内皮钙黏蛋白、肌动蛋白相关蛋白3、紧密连接蛋白11）表达均显著下调（P均<0.01）；生物素示踪染色显示雷公藤甲素给药组小鼠睾丸的血睾屏障随给药浓度升高，屏障渗漏损伤程度逐步加剧。结论： 雷公藤甲素给药可构建不同程度的小鼠血睾屏障损伤模型，其作用机制与诱导支持细胞凋亡、下调血睾屏障相关蛋白、激活氧化应激多条通路协同调控密切相关。

目的： 探究雾化人脐带间充质干细胞源胞外囊泡(human umbilical cord mesenchymal stem cellsderived extracellular vesicles，hUCMSC-EVs)对屋尘螨(house dust mite，HDM)脂多糖(lipopolysaccharides，LPS)诱导的中性粒细胞性哮喘小鼠气道炎症的影响及其潜在机制。方法： 采用超高速离心法提取hUCMSC-EVs；透射电镜观察hUCMSC-EVs形态；蛋白免疫印迹法检测细胞外囊泡中分化簇81(cluster of differentiation 81，CD81)、热休克蛋白70(heat shock protein 70，HSP70)、肿瘤易感基因101(tumor susceptibility gene 101，TSG101)和钙联蛋白(Calnexin)表达。构建HDM-LPS诱导的中性粒细胞性哮喘小鼠模型并给予hUCMSC-EVs雾化干预，将15只6~8周龄、雌性BALB/c小鼠随机分为对照组、HDM-LPS组和HDM-LPS+EVs组，每组5只；HE和过碘酸雪夫(periodic acid-Schiff，PAS)染色法分别观察肺脏气道周围炎性细胞浸润和杯状细胞化生情况；血细胞计数板和瑞氏吉姆萨染色分别计数肺泡灌洗液(bronchoalveolar lavage fluid，BALF)中炎症细胞和中性粒细胞总数；qRT-PCR检测小鼠肺脏组织C-X-C基序趋化因子配体15(C-X-C motif chemokineligand 15，Cxcl15)和Cxcl5 mRNA表达；采用相关试剂盒检测各组小鼠肺组织中亚铁离子和丙二醛含量，蛋白免疫印迹法检测谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4，GPX4)表达。激光共聚焦显微镜观察人支气管上皮细胞株HBE135E6E7对CMDil标记的hUCMSC-EVs的摄取情况；体外应用HDM-LPS、HDMLPS+EVs处理HBE135E6E7细胞，qRTPCR检测各组细胞中IL-8 mRNA和Cxcl5 mRNA表达，采用相关试剂盒和蛋白免疫印迹法分别检测各组亚铁离子、丙二醛和GPX4表达。结果： HUCMSC-EVs呈杯托样膜性结构且表达CD81、HSP70和TSG101。与对照组相比，HDM-LPS组小鼠气道周围炎性细胞浸润和杯状细胞化生程度明显，炎症和PAS染色评分显著升高(P<0.01)，BALF中总细胞和中性粒细胞数明显增多(P<0.01)，肺组织中Cxcl15 mRNA、Cxcl5 mRNA、亚铁离子和丙二醛含量显著增加而GPX4表达明显降低(P<001或P<0.05)；与HDM-LPS组相比，HDM-LPS+EVs组小鼠气道炎症和PAS评分显著降低，BALF中总细胞和中性粒细胞数均明显减少(P<0.01)，肺脏Cxcl15 mRNA、Cxcl5 mRNA、亚铁离子和丙二醛含量明显降低而GPX4蛋白表达明显升高(P<0.01或P<0.05)。体外实验结果显示，hUCMSC-EVs可经HBE135-E6E7细胞内吞；与HDM-LPS组相比，HDM-LPS+EVs组细胞中亚铁离子、丙二醛含量、IL-8 mRNA和Cxcl5 mRNA表达均显著降低而GPX4表达明显增加(P<0.01或P<0.05)。结论： 雾化hUCMSC-EVs可显著改善HDM-LPS诱导的中性粒细胞性哮喘小鼠气道炎症，其可能是通过抑制支气管上皮细胞铁死亡实现抗炎作用。

目的： 探讨绝经后女性月经初潮年龄、绝经年龄及生殖期与认知功能的关系。方法： 基于2018年中国健康与养老追踪调查数据，选取关键数据完整的绝经后女性1 829例，基于简易智力状态测验(MMSE)分为无认知障碍组(n=1 230)和认知障碍组(n=599)，比较两组基本特征。采用Logistic回归分析生殖因素与认知功能的关系，并采用限制性立方样条曲线探讨二者是否存在非线性关系。结果： 认知障碍组与无认知障碍组婚姻状况、居住地、文化程度、吸烟状况、高血压、抑郁症状、睡眠时长、绝经年龄、生殖期及MMSE得分差异均有统计学意义(P均<0.05)。调整混杂因素后，Logistic回归分析结果显示，与绝经年龄51~55岁组相比，绝经年龄≤45岁组认知障碍比例更高(OR=1.59，95%CI：1.15~2.10，P=0.014)；与生殖期36~40年组相比，生殖期≤30年组认知功能障碍比例更高(OR=1.68，95%CI：1.26~2.25，P=0.008)；未发现初潮年龄与认知功能存在关联；平滑曲线拟合未发现生殖因素与认知功能存在非线性关系。结论： 绝经年龄较小(≤45岁)和生殖期较短(≤30年)的女性发生认知障碍的风险更高，初潮年龄与认知障碍未见显著关联。

目的： 基于SEER数据库建立前列腺癌骨转移风险预测模型，为临床早期识别高危患者提供量化评估工具。方法： 从SEER数据库中筛选2018年1月1日至2021年12月31日期间确诊为前列腺癌骨转移的患者15 055例，采用分层随机抽样按照7∶3的比例划分为训练组（n=10 538）与验证组（n=4 517）。采用Cox比例风险回归模型筛选影响前列腺癌骨转移患者总生存期（overall survival，OS）、癌症特异性生存期（cancer-specific survival，CSS）的独立预后危险因素，基于上述独立影响因素分别构建OS、CSS列线图模型。采用一致性评价指标C指数、受试者工作特征（ROC）曲线、校准曲线及决策曲线分析法（DCA）从区分能力、拟合校准程度与临床净获益综合评价模型效能。结果： 多因素Cox回归分析显示，年龄≥80岁、种族、婚姻状态、格里森分级（Gleason，GS）评分7~9分、T4/TX分期、脑转移、肝转移、根治性手术、放疗、化疗是影响前列腺癌骨转移患者OS的独立危险因素（P均<0.05）。而50~59岁、年龄≥80岁、种族、婚姻状态、GS7~9分、T4/TX期、脑转移、肝转移及肺转移为影响前列腺癌骨转移患者CSS的独立危险因素（P均<0.05）。OS模型训练组C指数为0.710（95%CI：0.701~0.718），验证组为0.710（95%CI：0.697~0.723）；CSS模型训练组C指数为0.705（95%CI：0.695~0.715），验证组为0.697（95%CI：0.682~0.712）。OS模型列线图ROC曲线显示，训练组1、2、3年的AUC为0.75、0.72、0.72；验证组1、2、3年的AUC为0.74、0.71、0.70。CSS模型列线图ROC曲线显示，训练组1、2、3年的AUC为0.74、0.71、0.71；验证组1、2、3年的AUC为0.72、0.69、0.69。OS模型校准曲线显示，列线图预测概率与实际生存概率吻合度高；CSS模型校准曲线结果显示，列线图预测概率与实际肿瘤特异性生存概率吻合度高。DCA分析显示OS及CSS预测模型具有良好的临床实用价值。结论： 构建的列线图模型用于预测前列腺癌骨转移患者1、2、3年的OS和CSS，该模型展现出良好的区分效能，具备较高的临床应用价值。

目的： 探讨外周血B细胞活化因子(B-cell activating factor of TNF family，BAFF）、高迁移率族蛋白B1(highmobility group box-1，HMGB1)、miR-219a-5p在癫痫患儿外周血中的表达水平及预后评估价值。方法： 选取2023年4月至2024年3月青岛市市立医院收治的84例癫痫患儿为癫痫组，同期84例健康体检儿童为对照组；依据格拉斯哥预后评分将癫痫组分为预后良好组（n=61）和预后不良组（n=23）。收集所有研究对象基线资料，分别采用ELISA法、流式荧光法、qRT-PCR检测外周血BAFF、HMGB1、miR-219a-5p表达水平；对比两组及不同预后亚组临床指标与分子表达差异；采用多因素Logistic回归分析癫痫预后不良独立危险因素；Spearman相关分析三种分子指标间相关性；ROC曲线分析三项指标联合预测不良预后的效能。结果： 癫痫组外周血BAFF、HMGB1、miR-219a-5p表达水平均显著高于对照组（P＜0.01）；预后不良组患儿治疗前发作频率、发作持续时间及三项分子指标水平均高于预后良好组（P均＜0.01）。Logistic回归结果显示，治疗前发作频率过高、发作持续时间延长、外周高表达BAFF、HMGB1、miR-219a-5p均为小儿癫痫预后不良独立危险因素（P＜0.05）。Spearman分析提示BAFF、HMGB1、miR-219a-5p两两呈正相关（r值分别为0.468、0.432、0.547，P＜0.05）。ROC曲线分析结果显示，三项指标联合检测的曲线下面积为0.851，敏感度为0.87，特异度为0.81，预测效能最优（P＜0.05）。结论： BAFF、HMGB1、miR-219a-5p在小儿癫痫患儿外周血呈高表达，均为预后不良独立危险因素；三项指标联合检测可显著提升对小儿癫痫不良预后的预测效能。

目的： 在健康受试者中评估稳态条件下艾普拉唑对氯吡格雷药代动力学的影响。方法： 本研究采用随机、开放、交叉、自身对照试验设计。入组40例健康受试者，随机分为A、B两组，每组20例，A组予氯吡格雷75 mg，每日1次，连续给药7 d；B组予氯吡格雷75 mg+艾普拉唑10 mg，每日1次，连续给药7 d。经10 d清洗期后，两组交叉给药方案继续试验。测定氯吡格雷、氯吡格雷活性代谢物及氯吡格雷羧酸的血药浓度，用于药代动力学分析。结果： 氯吡格雷活性代谢物的系统暴露量在总人群及CYP2C19强代谢者中，几何均值比的90%CI均在0.80~1.25等效区间内。结论： 健康受试者中，艾普拉唑与氯吡格雷未见具有临床显著意义的药代动力学相互作用；在CYP2C19强代谢受试者中，亦无明显临床相关性。

细胞死亡是细胞在生理或病理刺激下，结构破坏、代谢停止与功能不可逆丧失并最终解体消亡的生命终止过程，经典的细胞死亡形式包括凋亡、自噬性细胞死亡、细胞焦亡和铁死亡等。氧化应激是指机体活性氧产生与清除失衡，导致活性氧过量积累，进而引发细胞损伤的过程。近年来，大量研究表明氧化应激与多种细胞死亡方式密切相关，包括凋亡、自噬、焦亡、铁死亡、双硫死亡、氧死亡以及免疫原性死亡等。本文针对各类细胞死亡形式与氧化应激的相关研究进展进行综述。

甲状腺疾病是常见内分泌代谢病，常伴肝功能与血糖代谢异常，其发病与甲状腺激素和胆汁酸的双向调控紧密相关。甲状腺激素可直接激活胆汁酸合成关键限速酶胆固醇7α-羟化酶（CYP7A1），或通过调节胆固醇代谢、肠道菌群间接影响胆汁酸合成，还能抑制胆固醇12α-羟化酶改变胆汁酸组成；促甲状腺激素则通过上调3-羟基-3-甲基戊二酸单酰辅酶A还原酶、激活相关信号通路降低CYP7A1水平。胆汁酸可反向激活G蛋白偶联受体5，促进甲状腺素向更具活性的三碘甲状腺原氨酸转化。甲状腺功能异常者常伴胆汁酸水平异常，肝脏疾病也伴随着甲状腺激素的变化。因此，本文就甲状腺功能异常与胆汁酸代谢关系进行探讨，旨在为临床治疗提供新视角。