细胞焦亡专题
李洁， 冯烨， 陆庆雪， 等.
2024, 34(04): 277-282.
目的： 以核因子E2相关因子2（nuclear factor E2 related factor 2,Nrf2）蛋白为切入点，基于Nrf2/NLRP3/GSDMD信号通路探究二十碳五烯酸（eicosapentaenoic acid,EPA）对脂多糖（lipopolysaccharide，LPS）诱导肾小球系膜细胞焦亡的调控作用，结合Nrf2激动剂（4-OI）、核苷酸结合寡聚化结构域样受体蛋白3(nucleotidebound oligomerized domainlike receptor protein 3,NLRP3)受体抑制剂（MCC950）探究EPA调控焦亡信号通路的机制。方法： LPS体外诱导肾小球系膜细胞（HBZY-1）焦亡模型，并根据不同药物处理分别设置空白对照组、LPS组、LPS+EPA组、LPS+EPA+4-OI组和LPS+EPA+MCC950组，其中LPS浓度为10 μg/mL，EPA、4-OI和MCC950的浓度均为200 μmol/L，按分组将药物同时加入培养板中处理48 h，利用CCK-8法、乳酸脱氢酶（LDH）释放实验、TUNEL染色检测细胞损伤，ELISA检测细胞上清液中炎症因子IL-1β、IL-18释放量，蛋白免疫印迹法检测Nrf2、NLRP3、Caspase-1、GSDMD蛋白表达水平。结果： LPS与EPA共处理HBZY-1细胞的细胞活力实验表明，10 μg/mL LPS刺激48 h显著降低了细胞活力（P<0.05），但20~200 μmol/L EPA对其有明显的保护作用（P<0.05）。采用200 μmol/L EPA进行后续实验发现，EPA可明显保护LPS造成的细胞损伤（P<0.01），减少炎性因子（P<0.01）、LDH的释放（P<0.01）和DNA的断裂并抑制焦亡信号通路的激活，促进Nrf2蛋白的表达（P<0.01）。结合4-OI、MCC950共处理发现4-OI可以促进EPA对焦亡的抑制作用（P<0.05），减少相关蛋白的表达以及因子的释放（P<0.05），并增强EPA对细胞的保护（P<0.01），而MCC950对EPA发挥的作用无显著影响。结论： EPA通过Nrf2抑制LPS诱导的HBZY-1细胞焦亡信号通路各分子的表达，发挥细胞保护作用。
