江苏大学学报（医学版）

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2023年第6期目次

医学版编辑部

2023, 33(06): 1.

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肺癌专题

刺槐素对非小细胞肺癌A549细胞的抑制作用及其机制

闫庆韬，万斯傲，刘意，等

2023, 33(06): 461-469.

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目的：探讨刺槐素对非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer，NSCLC)A549细胞迁移、侵袭和血管生成的影响及其分子机制。方法： MTT实验检测不同浓度刺槐素对A549细胞活力的影响并计算刺槐素IC₅₀；采用不同浓度刺槐素处理A549细胞，蛋白免疫印迹分别检测血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor，VEGF)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)和基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9，MMP-9)相对表达水平，划痕实验、Transwell侵袭实验、免疫荧光和小管生成实验分别检测细胞迁移、侵袭及血管生成能力；A549细胞转染过表达或敲减VEGF质粒，蛋白免疫印迹检测分别检测VEGF、E-cadherin和MMP-9相对表达水平，并进一步检测细胞迁移、侵袭及血管生成能力。结果： 与0 μmol/L组相比，10、20、30、40、50 μmol/L刺槐素组A549细胞活力均明显降低(P均<0.05)，且呈一定的浓度依赖性，IC₅₀为34.49 μmol/L；与0 μmol/L组相比，10、20、40 μmol/L组A549细胞迁移、侵袭及血管生成能力明显减弱(P均<0.05)，VEGF和MMP-9蛋白表达水平明显降低(P均<0.01)，E-cadherin蛋白表达水平明显增加(P均<0.01)；与空白对照或过表达阴性对照组相比，过表达组A549细胞MMP-9蛋白表达水平明显增加，E-cadherin蛋白表达水平明显降低，细胞迁移、侵袭及血管生成能力明显增强(P均<0.05)；与空白对照或敲减阴性对照组相比，敲减组A549细胞MMP-9蛋白表达水平明显降低，E-cadherin蛋白表达水平明显增加，细胞迁移、侵袭及血管生成能力明显减弱(P均<0.05)。结论： 刺槐素可能通过降低VEGF表达进而抑制NSCLC A549细胞迁移、侵袭及血管生成。

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肺癌专题

系统性免疫炎症指数联合前白蛋白对肺癌术后肺部感染的预测价值

徐蔚，高甜甜，李明樾，等

2023, 33(06): 470-474,485.

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目的： 探究系统性免疫炎症指数(systemic immune inflammation index，SII)与前白蛋白联合对肺癌术后肺部感染的预测价值。方法： 回顾性分析2017年1月至2021年12月徐州医科大学附属医院胸外科收治的1 025例行单一肺叶切除术的肺癌患者，根据术后是否感染分为感染组和非感染组，采用单因素和多因素Logistic回归分析肺癌术后发生肺部感染的危险因素；采用受试者工作特征(receiver operating characteristic，ROC)曲线分析SII与前白蛋白单独及联合对肺癌术后肺部感染发生的预测效能。结果： 1 025例肺癌患者中，108例(10.5%)术后出现肺部感染；与非感染组相比，感染组ASA分级、TNM分期、白细胞水平和SII值更高，合并糖尿病史更多，手术时间和肿瘤最大径更长，白蛋白和前白蛋白水平更低(P均<0.05)；多因素Logistic回归分析显示，手术时间长、合并糖尿病、前白蛋白水平低、SII值高是肺癌术后肺部感染的独立危险因素(P<0.05)；ROC曲线结果显示，SII曲线下面积(area under curve，AUC)为0.705(95%CI：0.656~0.755)，前白蛋白AUC为0.626(95%CI：0.572~0.680)；而SII联合前白蛋白预测肺部感染发生的AUC为0.751，优于单独对肺癌术后肺部感染的诊断预测价值(P<0.05)。结论： SII及前白蛋白可预测肺癌术后肺部感染的发生，两者联合诊断对肺部感染发生的预测价值更高。

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肺癌专题

电压门控钾通道亚家族G成员1在肺癌中的表达及生物学作用

程峰，彭诗晴，曹杨，等

2023, 33(06): 475-485.

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目的： 探讨电压门控钾通道亚家族G成员1(potassium voltage-gated channel subfamily G member 1,KCNG1)在人肺癌组织中的表达水平和临床意义以及其在肺癌细胞恶性生物学行为中的作用。方法： 通过TCGA数据库(The Cancer Genome Atlas)分析KCNG1 mRNA在人肺癌组织中的表达水平，探究其与肺癌患者临床病理特征及预后的关系；基于KCNG1 mRNA表达水平构建预测肺癌患者预后的列线图模型；采用基因本体(GO)功能富集分析和京都基因与基因组百科全书通路(KEGG)富集分析探究KCNG1潜在的生物学功能；采用基因集富集分析(GSEA)预测KCNG1相关差异表达基因参与调控的相关信号通路。采用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)及蛋白免疫印迹分别检测肺癌A549和H1299细胞系以及正常肺上皮细胞中KCNG1 mRNA和蛋白表达水平；通过转染siRNA构建KCNG1敲减的细胞株，分别采用EdU，Transwell，Matrigel Transwell，细胞划痕愈合及血管生成拟态实验检测细胞株生物学行为变化。结果： KCNG1 mRNA在肺癌组织中显著高表达且与肺癌患者不良预后密切相关(P均<0.05)；列线图模型初步证实KCNG1可能是肺癌潜在的生物标志物，并具有良好的预后评价功能；GO及KEGG富集分析提示KCNG1在调节激素分泌、离子转运、神经肽信号通路及细胞间黏附等生物学过程中发挥重要作用；GSEA结果提示KCNG1相关差异表达基因主要富集在KRAS，MTORC1，MYC，P53及WNT信号通路；KCNG1敲低的肺癌细胞增殖、迁移、侵袭和成管能力明显受到抑制(P均<0.05)。结论： KCNG1 mRNA在肺癌中显著高表达且与患者不良预后密切相关；siRNA介导的KCNG1敲低可显著抑制肺癌细胞的恶性生长。

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肺癌专题

肺癌恶病质的发病机制和临床治疗进展

周昊鹏，苏兆亮，刘芳

2023, 33(06): 486-492.

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支气管肺癌(简称肺癌)是发病率和死亡率居首位的恶性肿瘤。恶病质是一种多因素综合征，以骨骼肌和脂肪组织减少所致的体重减轻、代谢调节失衡和食物摄入减少为特征。恶病质已成为晚期肺癌最常见的瓶颈问题之一。越来越多的证据表明，肺癌恶病质与全身炎症因子介导的食欲下降、代谢和神经内分泌功能紊乱密切相关。目前肺癌恶病质的治疗方法包括营养支持、运动康复和药物治疗，其中潜在的治疗新药已成为热点。本文针对肺癌恶病质的概念、发病机制、诊断、分期和治疗的研究进展作一综述。

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纳米孔测序专题

基于高通量测序技术观察哮喘患儿上呼吸道菌群多样性的变化

秦大妮，马铁梁，沈惠平，等

2023, 33(06): 493-497.

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目的： 分析哮喘患儿上呼吸道菌群定植种类和数量与健康儿童之间的差异。方法： 选择2020年10月至2021年10月我院收治的8例学龄前哮喘患儿入哮喘组，另纳入18例同期在我院体检的健康儿童为对照组，分析两组之间呼吸道菌群种类及数量的差异。结果： 16S rDNA测序结果显示，哮喘患儿上呼吸道菌群物种丰富度及多样性增加，菌群结构发生显著变化。哮喘组和对照组共有扩增子序列变异（amplicon sequence variants，ASVs）375个，特有ASVs分别为889个和1 037个，哮喘组菌群ASVs相较于对照组发生显著变化。在门水平，与对照组比较，哮喘组中厚壁菌门的相对丰度明显下降（P<0.01），放线菌门（Actinobacteria）、梭杆菌门（Fusobacteria）、弯曲杆菌门（Campilobacterota）的相对丰度明显增加（P<0.05）。在属水平，与对照组比较，哮喘组链球菌属、鞘氨醇单胞菌属相对丰度减少，奈瑟菌属（Neisseria）相对丰度明显增加，差异均有统计学意义（均P<0.05）。结论：哮喘患儿上呼吸道菌群在种类和数量上与健康儿童之间存在显著差异，且哮喘患儿存在呼吸道菌群紊乱状态。

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纳米孔测序专题

纳米孔测序技术在DNA信息存储领域的应用

韩娜，黄蕾，强裕俊，等

2023, 33(06): 498-501，508.

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脱氧核糖核酸（DNA）存储是一种以人工合成的生物大分子DNA作为信息载体的新型存储技术，具有存储密度高、存储量大、存储时间长、损耗率低等优点，有望成为一种新的数据存储介质。随着DNA合成技术（数据写入）和DNA测序技术（数据读取）的快速发展，DNA存储已成为下一代存储技术的热点。然而目前通过二代测序技术实现DNA数据的读取仍然是一个操作复杂、耗时长且成本较高的过程。如何更深入融合和改进DNA合成技术和测序技术，将DNA信息的存储和读取进一步快速高效地实现，是目前需要解决的问题。本研究设计并实践了基于便携式的国产纳米孔测序平台开展DNA存储信息快速读取的可能性，实现了4 h内将存储于DNA片段中一首中文诗词进行重新测序和即时解码，验证了国产纳米孔测序技术从存储DNA信息的介质中即时读取信息的能力。

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纳米孔测序专题

纳米孔测序技术及其在病原学诊断中的应用进展

庄子，孟雨桐，刘润旸，等

2023, 33(06): 502-508.

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在病原学诊断中，基因测序扮演着重要的角色，测序技术也在不断地更新发展，其中牛津纳米孔科技（Oxford Nanopore Technologies，ONT）公司所推出的纳米孔测序技术近年来发展迅速，并凭借其超长读长、快速实时测序、简单便携以及能够读取蛋白质序列等诸多优势在医学领域获得了广泛的关注和应用。本文将主要介绍纳米孔测序技术的原理、特点以及在病原学诊断中的应用，并对该技术的未来发展进行展望。

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基础医学

aroC基因对迟缓爱德华氏菌生物学特性及致病性的影响

刘锐，高大庆，赵丹，等

2023, 33(06): 509-515.

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目的： 探讨aroC基因在迟缓爱德华氏菌（Edwardsiella tarda，Et）致病过程中的作用。方法： 采用自杀质粒同源重组方法制备Et的aroC基因缺失株（ΔaroC）和aroC的互补株（CΔaroC）；通过生物膜形成、运动性、细胞黏附、斑马鱼致病性、组织细菌载量等实验，分析aroC对Et致病性相关的生物学功能的影响。结果： aroC基因的缺失不影响Et生长速度；与野生株和CΔaroC相比，ΔaroC的生物膜形成能力、运动能力、黏附及胞外吲哚生成能力均显著降低（P<0.05或<0.01）；qRT-PCR结果显示，相比于野生株，ΔaroC鞭毛合成基因fliA和fliC的转录水平显著下降（P＜0.01），但flgK、flgL和fliS基因的转录水平无明显变化（P＞0.05）；与野生株相比，感染ΔaroC的斑马鱼症状明显减轻、存活率高，且ΔaroC在小鼠肠道和肝脏中的定植数目显著减少（P<0.05或<0.01）。结论： aroC基因影响Et的运动性、生物膜形成、黏附性等，进而调控Et对宿主细胞的致病力。

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基础医学

副溶血弧菌QsvR ChIP-qPCR方法的建立

张苗苗，李雪，陆仁飞，等

2023, 33(06): 516-520，527.

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目的： 建立副溶血弧菌QsvR的染色质免疫共沉淀实时定量PCR（ChIP-qPCR）实验方法。方法： 通过热激转化和转化结合将标记2×Flag标签的qsvR片段转入qsvR突变株（ΔqsvR）中，阿拉伯糖诱导表达QsvR-2×Flag蛋白，通过甲醛与基因组DNA进行交联形成2×Flag-QsvR-DNA复合物，将基因组DNA超声裂解为100~1 000 bp大小不等的片段，通过特异性抗原抗体反应将蛋白质-DNA复合物沉淀下来，高盐和加热解交联，回收DNA进行qPCR定量DNA，分析副溶血弧菌体内QsvR与靶基因的结合情况。结果： 成功构建出实验菌株ΔqsvR/pBAD33-qsvR-2×Flag，以不加阿拉伯糖诱导为对照，经阿拉伯糖诱导菌株的aphA、opaR、exsB和vtrA的免疫共沉淀量明显较高，表明在副溶血弧菌体内QsvR与aphA、opaR、exsB和vtrA具有结合作用。结论： 成功建立了副溶血弧菌QsvR的ChIP-qPCR实验方法，可用于原核生物体内蛋白质-DNA相互作用的研究。

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临床医学

肝脂肪变性相关指数对2型糖尿病患者合并非酒精性脂肪性肝病的预测价值

田昊文，邓霞，杨玲

2023, 33(06): 521-527.

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目的： 探讨2型糖尿病（type 2 diabetes mellitus，T2DM）人群中肝脂肪变性相关指数与非酒精性脂肪性肝病（nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD）的关系。方法： 共纳入566例T2DM受试者，收集临床资料，根据超声检查结果分为无NAFLD组与NAFLD组。比较两组受试者一般临床资料以及肝脏脂肪变性指数（hepatic steatosis index，HSI）和脂肪肝指数（fatty liver index，FLI）。Logistic回归分析以探讨HSI和FLI与T2DM患者发生NAFLD的关系。应用受试者工作特性（ROC）曲线评估HSI和FLI的诊断价值。结果： NAFLD组的HSI（40.66±5.60 vs 34.58±3.99）和FLI（58.86±21.21 vs 28.96±20.18）明显高于无NAFLD组（P＜0.001）。相关分析显示，HSI、FLI与稳态模型评估胰岛素抵抗指数(HOMA-IR)、腰围、三酰甘油和总胆固醇呈正相关，但与高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）呈负相关。Logistic回归分析显示，在控制代谢危险因素和降糖药物后，HSI和FLI仍然是T2DM患者发生NAFLD的独立危险因素。HSI诊断T2DM合并NAFLD的敏感性为82.5%，特异性为68.6%；FLI诊断T2DM合并NAFLD的敏感性为86.0%，特异度为70.5%。结论： HSI和FLI根据患者的常规生化指标计算而得，简单方便，对T2DM患者发生NAFLD具有良好的预测价值。

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临床医学

磁共振增强FLAIR序列在脑部转移瘤评估中的应用

黄海霞，陈建，代绕，等

2023, 33(06): 528-533.

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目的： 探讨增强液体衰减反转恢复序列（CE-T2 FLAIR）与增强T1WI序列(CE-T1WI)在检测脑转移瘤中的价值。方法： 回顾性分析江苏大学附属人民医院2021年8月至2022年12月收治且有完整临床资料的88例脑转移瘤患者的磁共振影像资料，比较CE-T1WI和CE-T2 FLAIR两种序列下脑转移瘤的数目、长径、部位、信号强度、肿瘤的强化程度、肿瘤/背景比，并采用Pearson相关分析转移瘤的长径与强化增长率（PI）的相关性。结果： 88例脑转移瘤共计430个病灶，CE-T1WI序列上显示340个，CE-T2 FLAIR序列上显示420个。只在CE-T2 FLAIR序列上显示的转移瘤80个，其中68个位于皮层或皮层下区，12个位于小脑半球，长径绝大多数小于7 mm；只在CE-T1WI序列上显示的转移瘤10个。与T1WI序列比较，在T2 FLAIR序列上增强前及增强后肿瘤与白质、肿瘤与脑脊液的对比率（CR）及对比信噪比（CNR）均明显增高（P＜0.001）；相对于T2 FLAIR序列，在T1WI序列上肿瘤的强化百分比明显增高（P＜0.001）。在同一切面的灰白质区转移瘤比较中，无论在白质中还是灰质中CE-T1WI序列的PI均比CE-T2 FLAIR明显增高（P＜0.05），对比率在灰白质区两种序列均无明显差异。在CE-T1WI序列上转移瘤长径与PI呈明显正相关（r=0.831,P＜0.001），而在CE-T2 FLAIR上转移瘤长径与PI无显著相关性（r=0.240,P＞0.05）。结论： CE-T2 FLAIR不仅能显示CE-T1WI显示的脑转移瘤，还能显示CE-T1WI未显示的微小转移瘤，是磁共振检测脑转移瘤必要的序列。

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综述

细胞自噬与糖尿病微血管并发症的关系研究进展

杨佳惠，庄淼，王杨宁致，等

2023, 33(06): 534-538，544.

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糖尿病微血管并发症作为糖尿病最常见的慢性并发症，是引起患者发生残疾、死亡的主要原因，但目前其发病机制尚不明确。近期研究表明，自噬作为机体重要的内源性防御机制，广泛参与调控糖尿病视网膜病变、糖尿病肾病、糖尿病周围神经病变等糖尿病微血管病变。本文就细胞自噬与3种糖尿病微血管并发症关系的研究进展进行综述，为临床预防和治疗提供思路。

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综述

炎症小体在心力衰竭发生发展中的作用及表观遗传学调控机制研究进展

潘璐，党时鹏，张桢烨，等

2023, 33(06): 539-544.

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心力衰竭（心衰）是各种原因导致心脏泵血功能受损，心排血量不能满足全身组织基本代谢需要的综合征。导致心衰发生的因素较多，大量研究表明炎症小体的异常激活参与心衰的发生发展。DNA甲基化、组蛋白翻译后修饰和非编码RNA对炎症小体的表观调控在心衰的发生发展中起重要作用。对于炎症小体及其表观调控的探讨不仅可开拓心衰发病机制研究的新方向，而且可能为心衰的治疗提供新的潜在靶点。本文主要综述炎症小体在心衰发生发展中的作用及其表观遗传学调控机制。

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综述

缺氧诱导因子-1α在金属毒性中的作用研究进展

张宇，赵文英，刘婷婷，等

2023, 33(06): 545-549.

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缺氧诱导因子-1α（hypoxia-inducible factor-1α，HIF-1α）是机体适应低氧的关键转录因子，可通过激活下游靶基因产生多种生物学效应。近年来不断有研究发现在常氧状态下金属暴露也可改变HIF-1α及其下游靶基因的表达，其产生的生物学效应既可表现为保护性反应，也可能是金属产生毒性效应的机制。与此同时，不同金属暴露对HIF-1α也有不同的效应，表现为金属特异性。甲基汞可降低神经系统及肝细胞中HIF-1α蛋白表达，镉可降低免疫系统中HIF-1α蛋白表达，引发毒性损伤；而锰、钴、镍、镉、铬、钛及铅在神经系统等多种系统或组织中增强HIF-1α蛋白积聚，也引发毒性损伤。铝对肝组织、锌对肾组织以及铜在心血管系统中增强HIF-1α表达但表现为保护性效应。因此，为明确金属的特异性损伤机制，并寻找有效的防治措施，金属暴露对HIF-1α表达的影响特征以及HIF-1α表达改变与金属损伤效应之间的关系值得进一步研究。

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