江苏大学学报（医学版）

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基础医学

重组慢病毒载体介导KSHV分子开关蛋白Rta在BCBL1细胞中的表达及其功能鉴定

陈菲严沁，卢春

2014, 24(02): 93-98,104.

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［摘要］目的: 构建含卡波氏肉瘤病毒(Kaposi′s sarcoma-associated herpesvirus，KSHV)分子开关蛋白，即复制和转录激活蛋白(replication and transcriptional activator，Rta)基因的重组慢病毒载体。方法: 从真核表达质粒pcDNA3.1-Rta中扩增出Rta基因，插入pHAGE-CMV-MCS-IzsGreen中，构建重组慢病毒载体pHAGE-Rta。将重组慢病毒骨架质粒pHAGERta与包装质粒psPAX2和包膜质粒pMD2.G共转染293 T细胞，通过荧光显微镜观察表达绿色荧光蛋白的293 T细胞占总数的百分比。收集病毒悬液，采用梯度稀释法测定病毒滴度。以不同感染复数(MOI)的Lentivirus-Rta病毒量感染BCBL-1细胞，72 h后检测Rta基因的表达，同时通过蛋白质印迹和病毒颗粒释放实验检测KSHV裂解期蛋白病毒白细胞介素-6(vIL-6)的表达及子代病毒颗粒的产出。结果：从真核表达质粒pcDNA3.1-Rta中扩增出Rta基因，插入pHAGE-CMV-MCS-IzsGreen后，酶切鉴定和核酸序列测定证实重组慢病毒骨架质粒pHAGERta构建成功。通过慢病毒包装3质粒表达系统获得了表达Rta基因的重组慢病毒，滴度约为2×107 efu/mL。以不同MOI的重组慢病毒感染BCBL-1细胞，72 h后可检测到外源基因编码Rta蛋白的表达，且其表达能够上调KSHV vIL6的表达水平及促进子代病毒颗粒的释放。结论：成功构建了含Rta基因的慢病毒表达载体，获得的重组病毒能够有效地感染BCBL1细胞，并发挥激活KSHV裂解期复制的生物学功能。

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基础医学

大豆异黄酮对动脉粥样硬化大鼠炎症分子相关基因表达的影响

罗洁1，秦旭1，韦余2，钱民章1

2014, 24(02): 99-104.

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目的: 研究大豆异黄酮(soybean isoflavone , SIF)对动脉粥样硬化(atherosclerosis，As)大鼠血管中促As炎症相关基因表达的影响。方法: 建立As大鼠模型，随机分成正常组、模型组、模型给药组和正常给药组；HE染色观察各组大鼠胸主动脉病理改变；实时PCR和免疫组化检测血管中促As炎症的相关基因表达量。结果：模型组胸主动脉严重萎缩、钙化，出现硬化斑块；模型给药组As病变较模型组明显减轻；正常组和正常给药组胸主动脉无病理改变。模型组胸主动脉中单核细胞趋化蛋白1(monocyte chemotactic protein-1, MCP-1)、CC类趋化因子受体2（C-C chemokine receptor, CCR2）、单核细胞趋化蛋白-1诱导蛋白（MCPIP）和C反应蛋白（CRP）mRNA表达量较正常组明显升高（P<0.01或P<0.05）；模型给药组上述4种基因mRNA表达量均较模型组明显降低（P<0.01或P<0.05）；正常组与正常给药组4种基因mRNA表达量间的差异无统计学意义。免疫组化结果显示，与正常组比较，模型组MCPIP、MCP-1、核因子κB (NF-κB)阳性染色和范围均增多（P<0.01），模型给药组3种蛋白的阳性染色和范围都较模型组明显减少（P<0.05）；正常组和正常给药组3种蛋白表达间的差异无统计学意义。结论：大豆异黄酮能显著降低促As炎症的相关基因表达，明显抑制大鼠As病变。

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基础医学

稳定表达狂犬病毒糖蛋白的重组新城疫病毒对人肺腺癌A549细胞荷瘤鼠瘤体生长的影响

贾丽娟1，2，刘洋2，张金2，梁冰1，张杰1，严玉兰2

2014, 24(02): 105-109,113.

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目的: 探讨重组稳定表达狂犬病毒糖蛋白的新城疫病毒疫苗(recombinant avirulent newcastle disease virus LaSota strain expressing the rabies virus glycoprotein，rl-RVG)对人肺腺癌A549细胞荷瘤鼠的生长抑制作用及其可能的免疫机制。方法: 建立A549荷瘤鼠模型并随机分为rlRVG组、新城疫病毒（NDV）组和对照组，每组10只，分别于瘤体注射rlRVG，NDV和PBS，每周2次，共3周。测量3组瘤体体积；免疫组织化学法测NDV及狂犬病毒糖蛋白(rabies virus glycoprotein，RVG)的表达；HE染色观察荷瘤小鼠的瘤体、脾、肺等组织病理改变；流式细胞术检测荷瘤小鼠脾脏NK细胞数。结果：与对照组相比，rl-RVG组及NDV组荷瘤鼠瘤体增长缓慢；NDV在rl-RVG组和NDV组中均有表达，而RVG仅在rl-RVG组中表达；rl-RVG组及NDV组瘤体出现大量凋亡坏死组织、脾脏多核巨细胞明显增多、肺组织炎症反应明显；rl-RVG组和NDV组NK细胞数明显增多，且rl-RVG组明显高于NDV组。结论： rl-RVG成功转染至A549荷瘤鼠，对其瘤体生长有着明显的抑制作用，可能与rl-RVG激活机体的免疫反应相关。

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基础医学

小鼠血管平滑肌细胞原代培养及体外钙化模型的制备

徐丽华，严金川，伍超，逯朝阳，王中群，袁伟

2014, 24(02): 110-113.

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目的: 建立一种简单、高效的小鼠主动脉血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells，VSMCs)原代培养方法及体外钙化模型。方法: 采用改良的组织贴块法培养小鼠VSMCs，经免疫荧光染色法鉴定后，将细胞随机分为对照组和钙化组。采用von kossa染色及比色法检测两组细胞内钙含量。结果：培养3~5 d时，可见细胞从组织块边缘爬出，7~10 d后细胞融合成片；免疫荧光染色显示胞质表达特异性α-肌动蛋白；VSMCs培养至第2代细胞纯度达95%；与对照组相比，钙化组细胞的钙含量、碱性磷酸酶（ALP）活性明显增加(P均<0.05)。结论：改良的组织贴块法可获得高纯度的小鼠VSMCs；β-甘油磷酸钠在体外可有效诱导其钙化。

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基础医学

伏马霉素通过上调TGF-β信号通路促进HepG2细胞增殖

曾甜甜，卢小东，陈路芳，陈园园，邵启祥

2014, 24(02): 114-117,121.

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目的: 研究伏马霉素B1(Fumonisin B1，FB1)对人肝癌HepG2细胞株增殖的作用及相关机制。方法：人肝癌HepG2细胞株接种至培养皿，分别设0、0.5、1.0、10、50 μmol/L伏马霉素浓度的DMEM培养液，处理48 h后，倒置显微镜观察细胞生长情况并计数。在此基础上，通过CCK-8实验观察FB1对细胞增殖的影响，实时荧光定量PCR检测转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)、Smad4(Drosophila mothers against decapentaplegic 4，Smad4)、纤溶酶原激活物抑制物1(plasminogen activator inhibitor 1，PAI-1)mRNA的表达。结果： FB1作用后，倒置显微镜下观察HepG2细胞有丝分裂象明显增加；CCK8实验结果显示，不同浓度FB1处理48 h后，HepG2细胞增殖随FB1浓度的增加而增加，呈剂量依赖性。实时定量PCR结果显示，与对照组相比，10 μmol/L组和50 μmol/L组Smad4，PAI-1 mRNA表达均显著上调，而0.5 μmol/L组和1.0 μmol/L组与对照组相比，差异无统计学意义；各浓度组TGF-β1 mRNA均较对照组显著上调。结论： FB1可以有效促进HepG2细胞增殖，其机制可能与上调TGF-β1，Smad4，PAI-1 mRNA表达，即TGFβ信号通路有关。

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基础医学

伏马霉素通过上调TGF-β信号通路促进HepG2细胞增殖

曾甜甜，卢小东，陈路芳，陈园园，邵启祥

2014, 24(02): 114-117,121.

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目的: 研究伏马霉素B1(Fumonisin B1，FB1)对人肝癌HepG2细胞株增殖的作用及相关机制。方法：人肝癌HepG2细胞株接种至培养皿，分别设0、0.5、1.0、10、50 μmol/L伏马霉素浓度的DMEM培养液，处理48 h后，倒置显微镜观察细胞生长情况并计数。在此基础上，通过CCK-8实验观察FB1对细胞增殖的影响，实时荧光定量PCR检测转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1，TGF-β1)、Smad4(Drosophila mothers against decapentaplegic 4，Smad4)、纤溶酶原激活物抑制物1(plasminogen activator inhibitor 1，PAI-1)mRNA的表达。结果： FB1作用后，倒置显微镜下观察HepG2细胞有丝分裂象明显增加；CCK8实验结果显示，不同浓度FB1处理48 h后，HepG2细胞增殖随FB1浓度的增加而增加，呈剂量依赖性。实时定量PCR结果显示，与对照组相比，10 μmol/L组和50 μmol/L组Smad4，PAI-1 mRNA表达均显著上调，而0.5 μmol/L组和1.0 μmol/L组与对照组相比，差异无统计学意义；各浓度组TGF-β1 mRNA均较对照组显著上调。结论： FB1可以有效促进HepG2细胞增殖，其机制可能与上调TGF-β1，Smad4，PAI-1 mRNA表达，即TGFβ信号通路有关。

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基础医学

Tet-off 诱导表达Egr-1 HEK293稳定细胞株的建立和鉴定

彭琬昕1，2，孟凡力2，3，金洁1，龚爱华1

2014, 24(02): 118-121.

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目的: 利用大肠埃希菌Tet-off 诱导表达调控系统构建多西环素调控的稳定细胞株。方法: 以pEGFP-Egr-1质粒为模板，扩增含早期生长反应蛋白（early growth response1, Egr-1）完整开放阅读框的DNA序列，经酶切后插入含四环素反应元件（tetracycline responsive element, TRE）序列的表达载体pTRE2hyg，获得重组质粒pTRE2hyg-Egr-1，将其转染293Tet-off细胞株，并用G418和多西环素筛选稳定表达Egr-1的细胞株。蛋白质印迹法检测多西环素诱导表达Egr-1情况；流式细胞术检测细胞增殖能力。结果：蛋白质印迹结果显示，外源性Egr-1蛋白表达受细胞培养液中多西环素调控，当从细胞培养液中去除多西环素后，Egr-1表达量明显升高。流式细胞检测结果显示Egr-1高表达细胞的增殖能力明显高于Egr1低表达细胞。结论：利用Tet-off体系成功构建Egr-1诱导表达的细胞株，细胞的增殖能力受Egr-1表达水平的影响。

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检验医学

Bcl-6基因3′UTR 双荧光素酶报告质粒的构建及其与miR-346靶向关系的验证

陈娟，袁靖，吴晶晶，田洁，汤新逸，芮棵，田新宇，张悦，刘海冰，耿丽娜，杨珺，许化溪，王胜军

2014, 24(02): 122-125.

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目的: 构建Bcl-6基因3′非编码区（3′untranslated region,3′UTR）荧光素酶报告质粒，分析miR-346对Bcl-6的调控作用。方法: 通过PicTar 数据库和 miRanda数据库预测可能与Bcl-6基因3′UTR作用的 miRNA；将人工合成的Bcl-6基因3′UTR区序列克隆至荧光素酶报告质粒 psiCHECK-2；将重组荧光素酶报告质粒和miRNA mimics共转染293T 细胞，用双荧光素酶检测试剂盒测定荧光素酶活性。结果： PicTar 数据库和 miRanda数据库预测交叉结果显示，miR-346与Bcl6基因3′UTR存在互补结合位点；构建的荧光素酶报告质粒经酶切及测序鉴定正确；重组质粒和miR-346 mimics共转染 293T 细胞后，荧光素酶报告质粒表达的荧光素酶活性降低66%左右。结论：成功构建了Bcl-6基因3′UTR荧光素酶报告质粒，筛选出和Bcl-6表达相关的miRNA即miR-346。

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检验医学

HPLC法同时测定金针菇中麦角甾醇和22,23二氢麦角甾醇的含量

易承学1，2, 童珊珊2, 徐希明2, 余江南2

2014, 24(02): 126-128.

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目的: 建立高效液相色谱（high performance liquid chromatography,HPLC)法同时测定金针菇中麦角甾醇和22，23二氢麦角甾醇含量。方法: 采用Inertsil ODSSP (250 mm×4.6 mm，5 μm) 色谱柱同时测定上述2种成分，流动相为甲醇，流速1.0 mL·min-1，检测波长为282 nm，柱温25 ℃。结果：麦角甾醇和22,23二氢麦角甾醇的进样量在0.025~1.5 μg范围内呈良好线性关系 (r =0.999 9)；平均回收率 (n=6) 分别为104.6%\[相对标准偏差(RSD )=0.89%\]，103.5%(RSD=3.34%)。结论：该方法简便，快速，准确，适用于测定金针菇中麦角甾醇和22,23二氢麦角甾醇的含量。

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检验医学

肺腺癌转移相关转录子-1和核因子-κB在食管鳞癌组织中的表达及其相关性

尹越1，张曌玥1，牟笑1，吴诗1，毛朝明2，陈德玉2

2014, 24(02): 129-133.

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目的: 研究肺腺癌转移相关转录子-1（metastasisassociated lung adenocarcinoma transcript 1，MALAT-1）和核因子-κB（NF-κB）在食管鳞状细胞癌（鳞癌）组织中的表达及其相关性。方法: 采用qRT-PCR技术检测60例食管鳞癌组织和癌旁组织中MALAT1和NFκB的mRNA水平的表达，免疫组化SP方法检测NF-κB的蛋白表达水平。统计分析MALAT1及NFκB与患者临床病理特征之间的关系以及两者的相关性。结果： MALAT-1和NF-κB mRNA在60例食管鳞癌组织中的表达均高于癌旁组织（Z=－3.600，P<0.001；Z=－2.856，P<0.05），且NFκB蛋白在食管鳞癌组织中的阳性表达率显著高于癌旁组织（χ2=36.39, P<0.001）。MALAT-1、NF-κB的表达均与食管鳞癌的分化程度、淋巴结转移以及TNM分期密切相关（P<0.05）。MALAT1与NFκB之间存在正相关（r=0.795，P<0.001）。结论：长链非编码RNA MALAT1可能在食管鳞癌的发生发展中发挥重要作用。

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不同血液透析方式对患者营养及微炎症状态的影响

胡永玮，宋素珍，闵群燕，邵敏

2014, 24(02): 134-138.

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目的: 探讨不同血液透析方式对维持性血液透析患者营养及微炎症状态的影响。方法: 将52例规律血液透析患者随机分成3组，分别为血液透析组(HD组，24例)，血液透析联合血液透析滤过组(HD+HDF组，14例)和血液透析联合血液灌流组(HD+HP组，14例)。治疗1年，比较3组患者治疗前后营养不良炎症评分(MIS)、C反应蛋白(CRP)、白蛋白、前白蛋白、血红蛋白、握力、肱三头肌皮褶厚度(TSF)的变化。结果：治疗1年后，HD+HDF组和HD+HP组MIS、CRP均明显低于HD组(P均<0.05)；HD+HDF组前白蛋白、CRP、握力、TSF均较HD组明显上升(P均<0.05)；HD+HP组MIS、前白蛋白、CRP、握力较HD组明显上升(P<0.05)，但TSF差别无统计学意义；HD+HDF组与HD+HP组相比，各指标间差异均无统计学意义(P均>0.05)。HD组治疗后仅血红蛋白水平较治疗前明显上升，MIS、前白蛋白、血红蛋白、握力和TSF较治疗前略有好转，但差异均无统计学意义；HD+HDF组的MIS、白蛋白、前白蛋白、CRP、血红蛋白、握力、TSF均较治疗前有所好转(P均<0.05)；HD+HP组的MIS、前白蛋白、CRP、握力较治疗前相比，差异均有统计学意义(P均<0.05)。结论：血液透析联合血液透析滤过、血液透析联合血液灌流较普通血液透析可更好地改善患者的营养状态，减轻微炎症反应。

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二维彩超和超声造影对微小肝癌诊断价值的对比分析

陈宝定，薛玉，吴新财，邓宏伟，尚梦圆，王珂珂，张慧霞

2014, 24(02): 139-141.

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目的: 分析直径≤2 cm微小肝癌二维超声和超声造影影像特征，评价二维彩超和超声造影对于微小肝癌临床诊断价值。方法：回顾性分析经二维彩超和超声造影检查的134例患者、共203个肝微小病灶的影像学特征和诊断结果，比较两种检查方法对微小肝癌的诊断价值。结果：二维超声和超声造影诊断微小肝癌的敏感性、特异性及准确性分别为81.3%(91/112)、82.4%（75/91）、81.8%（166/203）和91.1%（102/112）、93.4%（85/91）、92.1%(187/203)，两种检查方法的敏感性、特异性及准确性差异具有统计学意义(P＜0.05)。结论：二维彩超作为肝脏的常规影像检查手段，对于微小肝癌具有一定诊断价值，而超声造影可以进一步提高微小肝癌诊断的敏感性、特异性及准确性。

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临床医学

莫西沙星序贯治疗卫生保健相关性肺炎疗效观察

陈佩丽，郭东风，许晓春

2014, 24(02): 142-144.

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目的: 观察莫西沙星序贯治疗卫生保健相关性肺炎(healthycareassociated pneumonia，HCAP)的临床疗效。方法：选取HCAP患者62例，随机分成2组，治疗组31例，静滴莫西沙星0.4 g，1次/d，症状改善后加口服序贯治疗，疗程8~12 d；对照组31例，静滴头孢替安2.0 g/次，2次/d，疗程10~14 d；比较两组治疗效果。结果：治疗组和对照组临床有效率分别为93.5%和71.0%，细菌清除率分别为94.7%和61.1%，两组间差异均有统计学意义(P均<0.05)；治疗组疗程明显短于对照组(P<0.01)。结论：莫西沙星序贯治疗HCAP有效，细菌清除率高，有较高的临床价值。

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临床医学

莫西沙星序贯治疗卫生保健相关性肺炎疗效观察

陈佩丽，郭东风，许晓春

2014, 24(02): 142-144.

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目的: 观察莫西沙星序贯治疗卫生保健相关性肺炎(healthycareassociated pneumonia，HCAP)的临床疗效。方法：选取HCAP患者62例，随机分成2组，治疗组31例，静滴莫西沙星0.4 g，1次/d，症状改善后加口服序贯治疗，疗程8~12 d；对照组31例，静滴头孢替安2.0 g/次，2次/d，疗程10~14 d；比较两组治疗效果。结果：治疗组和对照组临床有效率分别为93.5%和71.0%，细菌清除率分别为94.7%和61.1%，两组间差异均有统计学意义(P均<0.05)；治疗组疗程明显短于对照组(P<0.01)。结论：莫西沙星序贯治疗HCAP有效，细菌清除率高，有较高的临床价值。

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临床医学

莫西沙星序贯治疗卫生保健相关性肺炎疗效观察

陈佩丽，郭东风，许晓春

2014, 24(02): 142-144.

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目的: 观察莫西沙星序贯治疗卫生保健相关性肺炎(healthycareassociated pneumonia，HCAP)的临床疗效。方法：选取HCAP患者62例，随机分成2组，治疗组31例，静滴莫西沙星0.4 g，1次/d，症状改善后加口服序贯治疗，疗程8~12 d；对照组31例，静滴头孢替安2.0 g/次，2次/d，疗程10~14 d；比较两组治疗效果。结果：治疗组和对照组临床有效率分别为93.5%和71.0%，细菌清除率分别为94.7%和61.1%，两组间差异均有统计学意义(P均<0.05)；治疗组疗程明显短于对照组(P<0.01)。结论：莫西沙星序贯治疗HCAP有效，细菌清除率高，有较高的临床价值。

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临床医学

糖调节受损和糖尿病患者的动脉僵硬度与10年心血管疾病风险评估

张倩1，付强2，魏鹏2，钟健1，朱可2

2014, 24(02): 145-148,152.

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目的: 探讨不同糖代谢状态患者血管僵硬度与基线资料的相关性，及其对10年心血管疾病发病风险的预测价值。方法: 入选研究对象105例，其中正常对照组47例，糖调节受损组32例，糖尿病组26例，收集患者基本资料、总胆固醇、LDL-C、三酰甘油、HDL-C、空腹血糖、空腹胰岛素(fasting insulin，FIN)、空腹C肽(fasting C-peptide，Cp)、HbA1c、颈股脉搏波传导速度（carotid-to-femoral pulse wave velocity，cfPWV）、颈桡脉搏波传导速度 (carotid-to-radial pulse wave velocity , cr-PWV)，行糖耐量试验( oral glucose tolerance test, OGTT) 2 h后测血糖（2hPG)；结合相关指标计算Framingham 10年心血管病风险(Framingham risk score，FRS)。结果： cf-PWV与糖调节受损情况、年龄、收缩压、2hPG正相关，与 FIN/Cp负相关；cr-PWV与性别相关，与HDL-C负相关。cf-PWV与cr-PWV之间也存在正相关,且在校正年龄、收缩压、HDLC因素后，仍相关。FRS与cf-PWV、FIN/Cp、Homa-IR(Cp)存在相关性，与cr-PWV则无明显相关性。结论： cf-PWV与FRS存在相关性，可作为评估患者10年心血管疾病发生风险的参考指标。

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临床医学

渗透树脂和氟化物处理对早期龋修复及抑制再脱矿作用的体外研究

储婷，孔凡芝，江玉凤，丁胜平，孙洪涛，仇晨光

2014, 24(02): 149-152.

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目的: 使用显微硬度计对渗透树脂和（或）氟化物处理人磨牙早期龋修复及抑制再脱矿作用进行评价。方法: 将人牙样本建立早期龋模型后分成4组，即对照组：不做处理；氟化物组：每日涂布0.05%氟化液；树脂组：使用渗透树脂处理人工龋；复合组：渗透树脂+氟化物，渗透树脂处理人工龋后，每日涂布0.05%氟化液。各组样本均浸泡于人工唾液中，8周后进行再脱矿处理。用显微硬度计测量记录早期龋、4周、8周和再脱矿后的牙釉质表面显微硬度值(vickers hardness number，VHN)。结果：对照组4周时VHN较早期龋显著提高，但与8周相比，差异无统计学意义。氟化物组4周、8周及再脱矿后VHN间差异均无统计学意义；树脂组再脱矿后VHN与4周、8周相比显著下降。复合组再脱矿后VHN与4周、8周相比，差异均无统计学意义。在4周和8周时，树脂组和复合组的VHN明显高于对照组和氟化物组，但树脂组与复合组相比，差异无统计学意义。在再脱矿处理后，复合组VHN显著高于其他3组，氟化物组与树脂组间差别无统计学意义。结论：渗透树脂和（或）氟化物处理均具有良好的修复早期龋的能力，但渗透树脂和氟化物共同处理后在硬度和防止再脱矿方面有更好的表现。

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临床医学

渗透树脂和氟化物处理对早期龋修复及抑制再脱矿作用的体外研究

储婷，孔凡芝，江玉凤，丁胜平，孙洪涛，仇晨光

2014, 24(02): 149-152.

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可视化

目的: 使用显微硬度计对渗透树脂和（或）氟化物处理人磨牙早期龋修复及抑制再脱矿作用进行评价。方法: 将人牙样本建立早期龋模型后分成4组，即对照组：不做处理；氟化物组：每日涂布0.05%氟化液；树脂组：使用渗透树脂处理人工龋；复合组：渗透树脂+氟化物，渗透树脂处理人工龋后，每日涂布0.05%氟化液。各组样本均浸泡于人工唾液中，8周后进行再脱矿处理。用显微硬度计测量记录早期龋、4周、8周和再脱矿后的牙釉质表面显微硬度值(vickers hardness number，VHN)。结果：对照组4周时VHN较早期龋显著提高，但与8周相比，差异无统计学意义。氟化物组4周、8周及再脱矿后VHN间差异均无统计学意义；树脂组再脱矿后VHN与4周、8周相比显著下降。复合组再脱矿后VHN与4周、8周相比，差异均无统计学意义。在4周和8周时，树脂组和复合组的VHN明显高于对照组和氟化物组，但树脂组与复合组相比，差异无统计学意义。在再脱矿处理后，复合组VHN显著高于其他3组，氟化物组与树脂组间差别无统计学意义。结论：渗透树脂和（或）氟化物处理均具有良好的修复早期龋的能力，但渗透树脂和氟化物共同处理后在硬度和防止再脱矿方面有更好的表现。

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临床医学

渗透树脂和氟化物处理对早期龋修复及抑制再脱矿作用的体外研究

储婷，孔凡芝，江玉凤，丁胜平，孙洪涛，仇晨光

2014, 24(02): 149-152.

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目的: 使用显微硬度计对渗透树脂和（或）氟化物处理人磨牙早期龋修复及抑制再脱矿作用进行评价。方法: 将人牙样本建立早期龋模型后分成4组，即对照组：不做处理；氟化物组：每日涂布0.05%氟化液；树脂组：使用渗透树脂处理人工龋；复合组：渗透树脂+氟化物，渗透树脂处理人工龋后，每日涂布0.05%氟化液。各组样本均浸泡于人工唾液中，8周后进行再脱矿处理。用显微硬度计测量记录早期龋、4周、8周和再脱矿后的牙釉质表面显微硬度值(vickers hardness number，VHN)。结果：对照组4周时VHN较早期龋显著提高，但与8周相比，差异无统计学意义。氟化物组4周、8周及再脱矿后VHN间差异均无统计学意义；树脂组再脱矿后VHN与4周、8周相比显著下降。复合组再脱矿后VHN与4周、8周相比，差异均无统计学意义。在4周和8周时，树脂组和复合组的VHN明显高于对照组和氟化物组，但树脂组与复合组相比，差异无统计学意义。在再脱矿处理后，复合组VHN显著高于其他3组，氟化物组与树脂组间差别无统计学意义。结论：渗透树脂和（或）氟化物处理均具有良好的修复早期龋的能力，但渗透树脂和氟化物共同处理后在硬度和防止再脱矿方面有更好的表现。

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临床医学

新型球囊限位器胸管应用于气胸胸腔闭式引流的疗效观察

王强，朱小波，吴伟敏，姜敏炎，张剑平

2014, 24(02): 153-157,159.

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目的: 总结和分析我院自行研制的新型球囊限位器胸管在临床胸腔闭式引流术中的应用及疗效。方法: 选择我院收治的自发性气胸患者 32例，外伤性气胸患者80例，随机分为4组，每组28例，分别使用新型球囊限位器胸管、硅胶胸管、双腔导尿管及中心静脉导管行胸腔闭式引流术治疗，分析并比较不同引流管的疗效及并发症情况。结果：新型胸管组手术操作时间为（11.1±1.8）min，硅胶胸管组为（20.7±3.9）min，双腔导尿管组为（20.3±3.5）min，中心静脉导管组为（11.9±2.0）min。新型胸管组治愈时间为（5.8±2.2）d，硅胶胸管组为（8.1±5.4）d，双腔导尿管组为（7.7±5.9）d，中心静脉导管组为（8.0±4.6）d。硅胶胸管组皮下气肿、管端滑出胸腔、管腔堵塞和肺修补手术例数分别为12、4、0、4 例，双腔导尿管组为3、1、2、5 例，中心静脉导管组为5、4、5、7例，而新型胸管组只有3例患者需行肺修补术，未发生皮下气肿、管端滑出及管腔堵塞。新型胸管组与其他组相比，多个上述相应指标间差异有统计学意义(P＜0.05)。结论：使用新型球囊限位器胸管行胸腔闭式引流术具有操作简便、快捷、无须缝线固定等优点，其滑脱、堵管及皮下气肿等并发症较少。

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临床医学

新型球囊限位器胸管应用于气胸胸腔闭式引流的疗效观察

王强，朱小波，吴伟敏，姜敏炎，张剑平

2014, 24(02): 153-157,159.

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目的: 总结和分析我院自行研制的新型球囊限位器胸管在临床胸腔闭式引流术中的应用及疗效。方法: 选择我院收治的自发性气胸患者 32例，外伤性气胸患者80例，随机分为4组，每组28例，分别使用新型球囊限位器胸管、硅胶胸管、双腔导尿管及中心静脉导管行胸腔闭式引流术治疗，分析并比较不同引流管的疗效及并发症情况。结果：新型胸管组手术操作时间为（11.1±1.8）min，硅胶胸管组为（20.7±3.9）min，双腔导尿管组为（20.3±3.5）min，中心静脉导管组为（11.9±2.0）min。新型胸管组治愈时间为（5.8±2.2）d，硅胶胸管组为（8.1±5.4）d，双腔导尿管组为（7.7±5.9）d，中心静脉导管组为（8.0±4.6）d。硅胶胸管组皮下气肿、管端滑出胸腔、管腔堵塞和肺修补手术例数分别为12、4、0、4 例，双腔导尿管组为3、1、2、5 例，中心静脉导管组为5、4、5、7例，而新型胸管组只有3例患者需行肺修补术，未发生皮下气肿、管端滑出及管腔堵塞。新型胸管组与其他组相比，多个上述相应指标间差异有统计学意义(P＜0.05)。结论：使用新型球囊限位器胸管行胸腔闭式引流术具有操作简便、快捷、无须缝线固定等优点，其滑脱、堵管及皮下气肿等并发症较少。

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临床医学

不同级别慢性阻塞性肺疾病患者对支气管舒张剂的反应

王远征

2014, 24(02): 156-159.

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目的: 探讨不同级别的慢性阻塞性肺疾病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)患者使用支气管舒张剂后的反应性差异。方法: 回顾性分析220例COPD患者，按病情程度分为Ⅰ~Ⅳ级，吸入支气管舒张剂沙丁胺醇后，分别比较肺功能流速指标1秒最大呼气容积(FEV1)与容量指标用力肺活量(FVC)的改变值。结果：支气管舒张后，COPD患者的FEV1与FVC均较试验前有不同程度增加(P均<0.01)。Ⅰ~Ⅳ级COPD患者在吸入β2受体激动剂后FEV1、FVC均有显著改善。按改变值的大小分段排列，Ⅰ~Ⅱ级COPD患者ΔFEV1较Ⅲ~Ⅳ级患者改善明显(P<0.01)；Ⅲ~Ⅳ级COPD患者ΔFVC较Ⅰ~Ⅱ级改善明显(P<0.01)。结论：不同级别COPD患者在使用支气管舒张剂后，流速与容量均得以改善。FEV1可作为Ⅰ~Ⅱ级COPD患者对支气管舒张试验反应的重要指标，FVC可作为Ⅲ~Ⅳ级COPD患者对支气管舒张试验的重要指标。

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极低出生体重儿支气管肺发育不良危险因素分析

赵玮婷，刘江勤，贲晓明

2014, 24(02): 160-162.

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目的: 探讨小胎龄低体重儿支气管肺发育不良（bronchopulmonary dysplasia,BPD）的发生率、危险因素及相关防治措施。方法: 141例极低出生体重儿中，BPD患儿43例，非BPD早产儿98例，采用SPSS 19.0统计软件包，从母亲因素、患儿出生情况、生后治疗等方面分析，探讨极低出生体重儿BPD发生的高危因素及防治措施。结果：极低出生体重儿BPD发生率为30.5%，胎龄<28周的超未成熟儿共8例，均发生BPD。BPD组胎龄及出生体重均较非BPD组低（P＜0.01），BPD主要发生在胎龄<30周、出生体重＜1.25 kg的早产儿。单因素分析发现，两组间胎龄、出生体重、母亲产前感染史、新生儿感染（包括肺部感染、败血症）、新生儿贫血、新生儿呼吸窘迫综合征、机械通气与否、机械通气时间、用氧时间、肺表面活性物质治疗均有统计学意义。Logistic多因素分析结果表明，胎龄<30周（OR 11.364，P<0.01）、出生体重<1.25 kg（OR 3.048，P<0.05）、机械通气（OR 11.890，P<0.01）是BPD发生的高危因素。结论：低出生体重、低胎龄及机械通气是BPD发生的危险因素，而母亲产前感染、新生儿感染、新生儿贫血、呼吸窘迫综合征、用氧时间也与BPD的发生有关，因此，避免早产及低出生体重儿、尽量缩短机械通气及用氧时间、防止及减少反复肺部感染，积极早期综合治疗是预防早产儿BPD的有效措施。

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经验技术交流

超声引导下小剂量凝血酶治疗医源性股动脉假性动脉瘤28例临床观察

陈阳1，尤威2，张平阳2，杨松3，赵艳芳4，叶飞2

2014, 24(02): 163-165.

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目的: 探讨经超声引导的小剂量凝血酶注射治疗经常规压迫法治疗无效的医源性股动脉假性动脉瘤（iatrogenic femoral artery pseudoaneurysms, IFAP）的有效性和安全性。方法: 28例经股动脉介入操作后经超声诊断明确为IFAP，常规压迫法治疗失败后，经超声引导行局部小剂量凝血酶注射治疗；记录治疗前后的瘤体体积、凝血酶用量、治疗效果和并发症，并随访观察住院期间以及1个月后的临床症状。结果：平均凝血酶用量为(112.7±24.6)U；注射凝血酶前后IFAP瘤体体积、患侧足趾血氧饱和度差异有统计学意义，所有患者均无远端栓塞等并发症发生。结论：超声引导的小剂量凝血酶注射法治疗IFAP有效、安全，是常规压迫法治疗失败后的有效补充手段。

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经验技术交流

表现为风湿症状的肿瘤及风湿病合并肿瘤36例临床分析

吴殿臣1，吕良敬2*，张春燕2，谭军1，饶艳婷1，唐江昱1

2014, 24(02): 166-168.

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目的: 探讨表现为风湿症状的恶性肿瘤及风湿病合并恶性肿瘤的临床特点。方法: 选择以风湿症状为主要表现的住院患者，恶性肿瘤23例(非风湿病组)和风湿病合并恶性肿瘤13例（风湿病组），对两组年龄、性别、临床表现、免疫指标、疾病种类、治疗效果、活检次数等方面进行临床分析和比较。结果：两组年龄、性别比较差异无统计学意义（P均>0.05）。两组风湿症状以多关节肿痛、肌肉疼痛、皮疹最为常见但差异均无统计学意义(P均>0.05)。两组临床症状以多发淋巴结肿大最为常见，但差异无统计学意义(P均>0.05)。非风湿病组抗核抗体阳性率为30.43%，类风湿因子、抗环瓜氨酸多肽抗体、抗dsDNA抗体阳性率均为8.70%。两组肿瘤以淋巴瘤常见(17例)，其次为白血病(5例)、多发性骨髓瘤(4例)，肺癌(4例)。风湿病组7例(53.84%)常规激素且免疫抑制剂治疗效果差。两组患者≥2次活检者共12例(33.33%)，≥2个组织取材活检者9例(25.00%)。结论：以风湿症状为主要表现的中老年患者，即使有抗体阳性，也要注意肿瘤可能；以风湿症状为主要表现的肿瘤或风湿病合并肿瘤，均以淋巴瘤多见；常需多次多部位活检才能诊断。

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经验技术交流

胆囊癌组织中微淋巴管密度的检测意义

张斌斌1，陈义钢2，丁厚中2*

2014, 24(02): 169-171.

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目的: 探讨使用D2-40（淋巴管内皮细胞标志物）检测胆囊癌组织中微淋巴管密度（lymphatic microvessel density, LMVD）的临床意义。方法: 应用组织芯片和免疫组织化学（S-P法）技术以D2-40单克隆抗体检测59例胆囊癌（其中肝脏侵犯13例，淋巴结转移27例）的癌中心与癌周组织和6例正常胆囊组织中LMVD的表达，并分析其与胆囊癌病理参数的关系。结果： LMVD在胆囊癌周边组织中的表达明显高于正常胆囊组织和癌中心组织中的表达（P＜0.01）。在胆囊癌中，D2-40阳性表达与患者性别、年龄、肝脏侵犯无关（P＞0.05），而与胆囊癌的淋巴结转移及临床分期（Nevin分期）有关（P＜0.05）。结论： D2-40 可以特异性识别人胆囊癌组织中微淋巴管内皮细胞，其标记的微淋巴管主要分布于癌周组织；LMVD可用来评估胆囊癌淋巴转移风险。

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经验技术交流

帕瑞昔布钠术前用于肝癌射频消融手术镇痛效果观察

谢荣，陈利，陈宝定

2014, 24(02): 172-173,176.

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目的: 探讨帕瑞昔布钠超前镇痛在肝癌射频消融手术中的镇痛效果。方法: 选取肝癌射频消融术患者40例，随机分为帕瑞昔布钠组和对照组，每组20例，帕瑞昔布钠组于麻醉诱导前30 min静脉注射帕瑞昔布钠1 mg/kg，对照组静脉注射等容量生理盐水。观察麻醉诱导前、穿刺针进皮时、穿刺针进肝包膜时、手术结束时的血压、心率、血氧饱和度和呼吸频率，记录各时间点疼痛视觉模拟（VAS）评分及麻醉期间不良反应。结果：两组各时间点血压、心率、血氧饱和度和呼吸频率间的差异均无统计学意义（P＞0.05）。帕瑞昔布钠组不良反应例数明显少于对照组（χ2= 19.971，P=0.000）；帕瑞昔布钠组术后2 h 的VAS评分为（2.66±1.22）,明显低于对照组的（3.89±1.44），差异有统计学意义（t=2.487，P=0.033），而两组术后5 min、20 min的VAS评分间的差异无统计学意义（P＞0.05）。结论：帕瑞昔布钠术前用于肝癌射频消融术可有效减轻术后疼痛。

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经验技术交流

法舒地尔对体外循环心脏瓣膜置换术患者术后认知功能的影响

袁菊芳，杭黎华，陈远峰，王洪，邵东华

2014, 24(02): 174-176.

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目的: 探讨法舒地尔对心脏手术术后认知功能的影响。方法: 择期体外循环(cardiac pulmonary bypass,CPB)下心脏瓣膜置换术患者40例，ASA分级Ⅱ～Ⅲ级，NYHA分级Ⅱ～Ⅲ级，随机分为法舒地尔组和对照组，每组20例。法舒地尔组麻醉诱导前缓慢静注法舒地尔30 mg（加入生理盐水100 mL），3 次/ d，对照组予等容的生理盐水。记录手术时间、主动脉阻断时间、CPB时间、麻醉时间、麻醉药用量、出血量、输血量、输液量、尿量及术后3天VAS评分。分别于CPB开始前(T1)、升主动脉开放(T2)、CPB结束 (T3)及术后6 h(T4)时抽取桡动脉和颈静脉球部血样行血气分析，计算动脉颈内静脉血氧含量差（Da-jvO2），脑氧摄取率 (CERO2)。于术前3 d，术后3、7 d应用简易精神状态检查量表(MMSE)评分，记录术后认知功能障碍的发生率。结果：与对照组比较，法舒地尔组T2 、T3 时颈内静脉球血氧饱和度（SjvO2）升高，Da-jvO2 和CERO2降低(P< 0.05)，术后3、7 d认知功能障碍发生率降低 (P< 0.05)。结论：法舒地尔通过降低CPB下心脏瓣膜置换术患者脑氧代谢率，可减少心脏瓣膜置换术患者术后认知功能障碍的发生率。

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述评与综述

线粒体膜18 kDa转位蛋白与外伤性脑损伤

包卿1，王存祖2，卞晓星1*

2014, 24(02): 177-180.

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述评与综述

阿霉素肾病动物模型的研究进展

郭继光1，白杨2，周广滨3

2014, 24(02): 181-184.

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