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• 2012年, 22卷, 第2期
  刊出日期：2012-03-30

    

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  基础医学
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  药学
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  综述
  

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基础医学
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  基础医学

  TGF－β1诱导人肝HL7702细胞发生上皮细胞间质转化的实验研究

  李婷芬，王冰莹，严永敏，李里明，蒋留留，钱晖

  2012, 22(2): 93-96.

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  目的: 探讨体外培养的人肝细胞系在重组人转化生长因子β1（TGF-β1）诱导下是否发生上皮-间质转化（epithelial-mesenchyme transition， EMT）以及相关标志物的表达变化。方法: 人类肝细胞HL7702在含20%小牛血清的1640培养液培养2 d，改用无血清培养并TGF-β1分别诱导24 h，48 h，72 h;观察诱导前后细胞的形态学变化，实时荧光定量RT-PCR及蛋白质免疫印迹技术分析细胞中EMT相关基因和蛋白表达情况。 结果: 显微镜下观察到TGF-β1诱导前，肝细胞是不规则的六边形，诱导后细胞形态拉长变成纺锤形，细胞间隙变大;实时荧光定量RT-PCR和免疫印迹显示上皮化标志物E-钙黏附蛋白在TGF-β1诱导后的细胞中表达显著下降，而间质化标志物N-钙黏附蛋白、波形蛋白和Twist却显著增加。 结论: 正常人类肝细胞株HL7702经重组人TGF-β1的诱导发生上皮间质转化，这为深入研究TGF-β1和肝纤维化之间的关系奠定了基础。
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  基础医学

  转染CTGF基因对乳腺癌细胞MMP－2及TIMP－2表达的影响

  许斌1，陈寅2，戴桂红2，蒋小芹2，王薇2，赵国军2，于鸿2

  2012, 22(2): 97-100.

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  目的: 通过研究结缔组织生长因子（CTGF）基因对人乳腺癌MCF-7细胞株基质金属蛋白酶-2（MMP-2）、基质金属蛋白酶组织抑制因子-2（TIMP-2）表达的影响，深入探讨CTGF在乳腺癌侵袭和转移中的作用机制。方法: 采用脂质体介导法，将CTGF基因瞬时转染体外培养的人MCF-7细胞，并用免疫荧光、RT-PCR和蛋白质印迹法检测其转染成功与否;再采用蛋白质印迹法检测转基因MCF-7 MMP-2及TIMP-2表达改变。结果: 与对照组相比，转染CTGF基因的MCF-7，其CTGF mRNA和蛋白表达均显著增高，MMP-2蛋白表达水平显著增高，而TIMP-2蛋白表达水平显著降低。 结论:  CTGF可能通过增加乳腺癌细胞MMP-2表达及抑制TIMP-2的生成而起到促进乳腺癌侵袭和转移的作用。
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  基础医学

  玻璃苣醇提物对慢性抑郁模型小鼠脑组织中神经递质的影响

  刚宏林, 何志一, 刘相辉, 马跃

  2012, 22(2): 101-103.

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  目的: 通过建立慢性应激小鼠抑郁模型，观察玻璃苣对慢性应激抑郁模型小鼠脑内5-羟色胺、去甲肾上腺素（NE）、多巴胺3种单胺类神经递质的影响，初步探讨玻璃苣对抑郁模型小鼠的影响及其作用机制。方法: 利用孤养和长期不可预见性温和应激（CUMS）建立慢性应激小鼠抑郁模型，采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）测定慢性应激抑郁模型小鼠脑内单胺类神经递质的变化。结果: 模型组小鼠脑内5-羟色胺、NE、多巴胺含量明显低于正常组;  与模型组相比，玻璃苣醇提物高、中剂量组小鼠脑内5-羟色胺、NE、多巴胺的含量均有升高，且差异有统计学意义。玻璃苣醇提物低剂量组小鼠脑内5-羟色胺、NE、多巴胺的含量也有升高趋势，但差异无统计学意义。结论: 玻璃苣能够提高慢性应激抑郁模型小鼠脑内单胺类神经递质（5-羟色胺、NE、多巴胺）的含量，玻璃苣对小鼠脑内神经递质的作用可能是其对抑郁模型小鼠产生影响的可能机制。
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  基础医学

  雷公藤甲素通过调节microRNA21的表达干预K562/A02细胞的化疗敏感性

  惠璐璐，许文林，沈慧玲，陈巧云，朱小兰，龙璐璐，徐颖

  2012, 22(2): 104-109.

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  目的: 研究雷公藤甲素对K562/A02细胞多药耐药性的逆转作用，并探讨其机制。方法: 四甲基偶氮唑盐比色（MTT）法检测雷公藤甲素细胞毒性;采用非毒性浓度雷公藤甲素作用于K562/A02细胞，AnnexinV/PI双标法检测细胞凋亡;荧光定量PCR检测microRNA21表达水平;蛋白印迹法检测Bcl-2蛋白表达水平。microRNA21反义寡核苷酸转染K562/A02细胞，观察细胞增长率，凋亡率和Bcl-2表达的变化。结果: 非毒性浓度（5 nmol/L）雷公藤甲素明显增强K562/A02细胞对多柔比星的敏感性，并能增强多柔比星诱导细胞凋亡的作用，使K562/A02细胞平均凋亡率由4.3%明显上升到18.5%（P< 0.05）;雷公藤甲素作用后，microRNA21和Bcl-2蛋白水平降低;microRNA21反义寡核苷酸转染K562/A02细胞后，降低了Bcl-2表达，提高多柔比星敏感性和多柔比星诱导的细胞凋亡。 结论: 雷公藤甲素增强K562/A02细胞对多柔比星的敏感性，并诱导其凋亡，可能与下调microRNA21水平有关。
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  基础医学

  外源性一氧化碳释放分子对脓毒症小鼠神经系统抗炎的调节作用

  仇雪枫，孙炳伟，王敏，孙艳，杨国涛，王波

  2012, 22(2): 110-113.

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  目的: 探讨外源性一氧化碳释放分子（carbon monoxide-releasing molecule-2，CORM-2）干预在脓毒症小鼠神经系统抗炎中的调节作用及其可能的机制。方法: 采用盲肠结扎穿孔（cecal ligation and puncture，CLP）法建立脓毒症模型。48只雄性昆明种小鼠，随机分为假手术组、CLP模型组、CORM-2干预组和卡巴胆碱组。CLP术后24 h处死小鼠并收集血浆、脑组织标本。分别检测脑组织中TNF-α、IL-6等炎症因子的表达，神经抗炎递质乙酰胆碱的表达以及血清乙酰胆碱酯酶活性。测定脑组织湿/干重比并观察脑组织病理变化。结果: 与CLP模型组比较，CORM-2干预组和卡巴胆碱组脑间质水肿程度减轻，白细胞浸润明显减少;脑组织中细胞因子的表达水平明显下调（P <  0.05）;脑内神经抗炎递质乙酰胆碱浓度较CLP组增加（P <0.05），血清乙酰胆碱酯酶的活性较CLP组减弱（P <0.05）。 结论: CORM-2干预脓毒症小鼠，能够下调细胞因子水平，增加神经抗炎递质的表达，在神经系统抗炎中起到一定的增强作用。
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  基础医学

  伤寒沙门菌核糖核酸酶 G对胞内非编码RNA T3956水平的影响

  王菲，孟彦辰，詹莉芳，张晓磊，张海方，生秀梅，徐顺高，黄新祥

  2012, 22(2): 114-119.

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  目的: 研究伤寒沙门菌核糖核酸酶G（RNase G）对非编码RNA（ncRNA）T3956胞内水平的影响。方法:   利用自杀质粒介导的同源重组方法制备伤寒沙门菌RNase G基因（rng）缺陷变异株;利用重组质粒pBAD将rng导入rng缺陷变异株，构建rng缺陷回补株;通过实时定量PCR分别比较伤寒沙门菌野生株、rng缺陷变异株、回补株等在不同生长时期的ncRNA T3956水平。结果: 成功制备伤寒沙门菌rng缺陷变异株、rng缺陷回补株和空质粒对照株;  实时定量PCR结果表明，rng缺陷株中T3956的胞内水平较野生株有所升高，并且在对数中期和稳态期升高得更加明显，而回补株胞内T3956的水平又得到恢复。结论: 伤寒沙门菌RNase G能够参与对胞内ncRNA T3956水平的调控，并且在细菌对数生长中期和稳态期作用更为明显。
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  基础医学

  鼠IFN－λ2腺病毒载体的构建及鉴定

  刘洋1，袁利学2，步雪峰1，严玉兰1

  2012, 22(2): 120-124.

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  目的: 构建鼠IFN-λ2重组腺病毒载体。方法: 用人水疱口炎病毒诱导小鼠原代脾细胞表达IFN-λ2，通过  RT-PCR获取IFN-λ2 cDNA，将其亚克隆至pShuttle-CMV载体，经PmeⅠ线性化后，与腺病毒的骨架载体pAdEasy在BJ5183菌中同源重组，转染293A细胞包装扩增，RT-PCR检测重组腺病毒的目的基因，TCID₅₀ 法对构建的腺病毒进行滴度测定。用鼠IFN-λ2重组腺病毒感染小鼠肺腺癌细胞，蛋白质印迹法检测细胞中IFN-λ2蛋白的表达，倒置显微镜观察鼠IFN-λ2重组腺病毒对鼠肺腺癌细胞生长的抑制作用。结果: 成功克隆鼠IFN-λ2的cDNA，序列与基因库公布序列完全一致;经酶切鉴定表明成功构建鼠IFN-λ2重组腺病毒载体;重组腺病毒载体在293A细胞中成功包装及扩增;包装成功的重组腺病毒中含有目的基因，病毒滴度为2×10¹⁰ pfu/ml;蛋白质印迹显示感染细胞的上清中有鼠IFN-  λ2蛋白的表达，倒置显微镜显示感染的鼠肺腺癌细胞生长受到抑制。 结论: 成功构建了鼠IFN-λ2重组腺病毒载体，并能介导鼠IFN-λ2蛋白的表达进而抑制鼠肺腺癌细胞的生长，为进一步开展抗肿瘤研究及基因治疗奠定基础。
临床医学
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  临床医学

  不同发育阶段恒牙牙髓组织中VEGF及受体的表达

  关为群，王清妹

  2012, 22(2): 125-129.

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  目的: 探讨人年轻恒牙和成熟恒牙牙髓组织中VEGF及其受体Flt-1、Flk-1的组织学和分子水平的表达。方法: 将因正畸治疗需要而拔除的人健康前磨牙分为根尖开放的年轻恒牙和根尖闭合的成熟恒牙，每组各15例。采用免疫组织化学方法检测VEGF及受体Flt-1、Flk-1蛋白的表达;RT-PCR法检测人年轻恒牙和成熟恒牙牙髓组织中VEGF、Flt-1、Flk-1的mRNA表达情况。 结果: 免疫组化显示年轻恒牙牙髓VEGF，Flk-1阳性表达的平均光密度（D）值高于成熟恒牙（P <0.05），而Flt-1的表达低于成熟恒牙（P <0.05）。RT-PCR结果显示人年轻恒牙和成熟恒牙牙髓组织均可表达VEGF、Flt-1、Flk-1的mRNA，产物大小分别为145 bp、169 bp和162 bp，且年轻恒牙牙髓组织VEGF、Flt-1、Flk-1的mRNA相对含量分别是成熟恒牙的1.7倍、0.6倍和1.5倍（P <0.05）。结论: 在人健康恒牙的牙髓组织中，VEGF、Flt-1、Flk-1的表达随根尖孔的闭合与否呈现不同表达特征，提示在恒牙的不同发育阶段可通过调控上述基因诱导修复性牙本质形成。
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  临床医学

  汉防己甲素对肝癌耐药细胞抑制作用机制研究

  孙倩茹1，王炳芳2，张明2，王庆华2

  2012, 22(2): 130-132.

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  目的: 应用汉防己甲素（tetrandrine，TET）作用于肝癌耐药细胞系，探讨TET及其联合抗癌药物抑制肝癌耐药细胞系增殖的可能机制。方法: 肝癌耐药细胞株BEL-7402/DOX经TET或联合多柔比星（doxorubicin，DOX）处理后，MTT法检测肝癌耐药细胞抑制率，荧光分光光度计测定的D值计算细胞内DOX的浓度，Fura-2/AM方法测细胞内Ca²⁺的浓度。结果:  TET对BEL-7402/DOX细胞的增殖有一定的抑制作用，并可增加DOX对BEL-7402/DOX细胞的抑制作用，且呈剂量相关性。不同浓度的TET与DOX合用均可显著增加BEL-7402/DOX细胞内的DOX浓度（P < 0.05～0.01）。浓度为5.0 mg/L、10.0 mg/L的TET均可显著降低BEL-7402/DOX细胞内的Ca²⁺ 浓度（P <0.05，P <0.01）。 结论: TET及其联合抗癌药抑制肝癌耐药细胞系增殖的机制，可能与其降低细胞内Ca²⁺浓度，阻抑信息传递，提高细胞内DOX浓度有关。
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  临床医学

  经右腋下小切口和胸骨正中切口二尖瓣成形术的比较

  陈成，周庆，李庆国，张杰，王东进

  2012, 22(2): 133-136.

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  目的: 比较经右腋下小切口和胸骨正中切口行二尖瓣成形术的效果。方法: 回顾性分析2002年1月至2010年11月两种切口行二尖瓣成形术的93例病例资料，右腋下小切口组36例，胸骨正中切口组57例。两组病例皆在浅低温体外循环下进行二尖瓣修复。结果: 术后右腋下小切口组死亡1例（2.8%），胸骨正中切口组无死亡病例，两组远期均无死亡病例。右腋下小切口体外循环建立时间明显比胸骨正中切口组长（P <0.05）;右腋下小切口组术后24 h引流量、输血量均比胸骨正中切口组少（P均<0.05）;机械通气时间右腋下小切口组也比胸骨正中切口组短（P <0.05）。两组主动脉阻断时间、转流时间、总手术时间比较差异无统计学意义。结论: 右腋下小切口行二尖瓣成形术具有良好的美观和临床效果，其微创和美观的优势给二尖瓣成形术提供了另一选择。
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  临床医学

   吗啡对乳腺癌MCF－7细胞生存素及livin表达的影响

  钱宁1，孙灿林2，姜琳2，赵国军3，蒋小芹3，于鸿3

  2012, 22(2): 137-140.

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  目的: 探讨吗啡对人乳腺癌MCF-7细胞生存素（survivin）和livin的表达及细胞增殖与凋亡的影响。方法: 人乳腺癌MCF-7细胞以1×10³ 个/ml密度接种在6孔板内，随机分为对照组，0.1μmol/L吗啡组，1.0μmol/L 吗啡组。于吗啡孵育24 h时，分别采用RT-PCR法和蛋白质印迹法测定细胞内生存素及livin mRNA及蛋白表达，流  式细胞术检测细胞凋亡改变;于吗啡孵育24，48及72 h时采用MTT法检测细胞增殖改变情况。结果: 与对照组比较，0.1μmol/L吗啡组及1.0μmol/L吗啡组生存素和livin蛋白及mRNA表达水平均显著降低（P <0.01），0.1μmol/  L吗啡组及1.0μmol/L吗啡组细胞增殖降低而细胞凋亡增加（P <0.01）。结论: 吗啡通过下调MCF-7细胞生存素和 livin的表达，从而抑制细胞增殖并促进细胞凋亡。
基础医学
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  基础医学

  舍曲林早期联用氟哌噻吨美利曲辛治疗卒中后抑郁患者的疗效观察

  范蓉1，高德2，辛世萌1，林永忠1，尹琳1

  2012, 22(2): 141-143.

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  目的: 探讨舍曲林在治疗卒中后抑郁患者的早期联用氟哌噻吨美利曲辛的疗效。方法: 将90例患者随机分为两组，联合用药组采用舍曲林联用氟哌噻吨美利曲辛治疗，两周后停用氟哌噻吨美利曲辛;对照组仅予舍曲林治疗。于治疗前及治疗第1、2、4周末进行HAMD、NIHSS及BI指数评分。结果: 与治疗前相比，两组治疗后的 HAMD、NIHSS评分均随着治疗时间下降，BI指数随着治疗时间逐渐好转，差异均有统计学意义（P<0.05）;联合用药  组于治疗1、2周末的HAMD、NIHSS评分较对照组下降更明显，BI指数评分较对照组好转更明显，差异有统计学意义（P <0.01）;两组于治疗4周末的HAMD、NIHSS评分，BI指数比较差异无统计学意义（P >0.05）;联合用药组的不良反应发生率少于对照组，差异有统计学意义（P <0.05）。结论: 卒中后抑郁患者给予舍曲林早期联合氟哌噻吨美利曲辛治疗，起效快，抗抑郁效果好，不良反应减少，依从性好，有利于神经功能的康复及日常生活能力的恢复。
临床医学
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  临床医学

  一期前路病灶清除植骨加后路内固定术治疗胸腰椎脊柱结核

  朱文骏，丁亮华，孙晓亮，何双华

  2012, 22(2): 144-146.

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  目的: 评价一期前路病灶清除植骨后路内固定术治疗胸腰椎脊柱结核的临床疗效。方法: 胸、腰椎结核  患者20例，男10例，女10例;经2～4周正规抗结核治疗后行一期前路结核病灶清除，椎间植骨，一期后路内固定术， 术后继续抗结核治疗1年。计算20例胸腰椎结核患者术前、术后1周及末次随访时Cobb角，采用配对t检验进行统计学分析。分析术前与术后脊髓神经功能ASIA分级情况。结果: 术后随访时间10个月～3年，平均15个月。1例脊柱结核复发。植骨愈合时间3～10个月，平均6个月。脊柱后凸畸形较术前均有不同程度的矫正。术后并发手术切口感染形成慢性窦道1例，经窦道清除术后痊愈。术前与术后Cobb角差异有统计学意义。术后所有病例神经功能均获得改善。 结论: 经前路病灶清除植骨一期后路内固定术治疗脊柱结核能彻底清除结核病灶，矫正脊柱后凸畸形，  促进脊髓及神经功能恢复。
药学
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  药学

  药学玫瑰茄花萼中脂肪酸成分的GC－MS分析

  张冰涛1，赵婷2，邹艳敏1，邹烨2，郑大恒2，曲洪媛1，李峰1，仰榴青3

  2012, 22(2): 147-150.

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  目的: 采用气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）对玫瑰茄花萼中提取的油脂进行脂肪酸组成分析。方法:   采用索氏提取法提取玫瑰茄花萼中的油脂，甲酯化后运用GC-MS联用技术进行分离和结构鉴定。结果: 玫瑰茄花萼油脂中含有17种脂肪酸，其中主要的脂肪酸为亚油酸（45.03%）、油酸（23.62%）、棕榈酸（22.91%）、硬脂酸    （3.41%）、（10 E）-10-十九烯酸（1.91%）、棕榈油酸（0.84%）、花生酸（0.53%）和肉豆蔻酸（0.34%）。其中不饱和脂肪酸含量高达71.40%以上。结论: 玫瑰茄油脂中富含不饱和脂肪酸，具有较高的营养价值和保健功能。
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  药学

  SBA－15表面咖啡因分子印迹聚合物的制备及性能研究

  吴云1，戈延茹1，潘如1，付文艳1，闫永胜2，戚雪勇2

  2012, 22(2): 151-154.

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  目的: 探讨咖啡因表面分子印迹聚合物的吸附性能，分析该印迹聚合物用于提取茶叶中咖啡因的可行性。方法: 以咖啡因（caffeine）为模板分子，功能化的介孔分子筛SBA-15为载体材料，合成咖啡因表面分子印迹聚合物。采用扫描电镜对其表面进行表征，利用吸附平衡实验研究聚合物对咖啡因的吸附性能;用该印迹聚合物提取茶叶中的咖啡因。结果: 在最佳吸附pH为7.0的条件下，印迹聚合物吸附速度快，吸附容量大，对咖啡因的吸附平衡和动力学数据分别符合Freundlich等温线模型和Pseudo-second-order动力学模型。提取实验表明印迹聚合物能有效地从茶叶粗提物中分离咖啡因。结论: 分子印迹技术为茶叶中有效成分的提取分离提供了新思路。
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  药学

  正交试验优选肾炎消白颗粒提取工艺及中试研究

  白海玉，韩德强，杨微，王朝宇

  2012, 22(2): 155-158.

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  目的: 优选肾炎消白颗粒水提工艺。方法: 采用正交试验法，以提取总固体得率和黄芪甲苷含量为指标，优选出肾炎消白颗粒的提取工艺，并进行中试研究。结果: 实验室按处方量十分之一（132 g）投料，加水8倍量体积，提取3次，每次2 h;中试按处方量12倍（15.84 kg），工艺确定为加8倍量水煎煮3次，一煎、二煎各1.5 h，三煎1 h为最佳提取条件。结论: 实验室得到的工艺与中试有差异。
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  药学

  高山红景天挥发油水溶性部分GC－MS分析

  付文艳，吴云，潘如，戈延茹，傅海珍

  2012, 22(2): 159-161.

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  目的: 分析吉林长白山产高山红景天（Rhodiola sachalinensis A.Bor.）干燥根的挥发油水溶性部分化学成分。方法: 采用水蒸汽蒸馏法提取挥发油水溶性部分并利用气相色谱—质谱（GC-MS）对其成分进行分析。结果: 共分离出25个峰，鉴定出18种化合物，根据面积归一法测其相对含量为90.17%。高山红景天挥发油水溶性部分中主要成分为桃金娘烯醇（28.04%），顺式氧化芳樟醇（16.90%），正辛醇（10.05%）等。结论:  GC-MS结果为红景天的产品开发提供了理论基础。
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  药学

  星点设计—效应面法优化依托贝特缓释胶囊的制备

  曹升1，张朝晖1，吴小涛2，何红燕2，霍苙茹2

  2012, 22(2): 162-166.

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  目的: 制备依托贝特缓释胶囊，并采用星点设计—效应面法对依托贝特缓释胶囊的处方进行优化。方法: 采用离心造粒法制备依托贝特母丸，PEG4000与依托贝特的丙酮溶液包增溶层，以丙烯酸树脂水分散体溶液（Eudragit RL30D）包缓释层。考察因素为增溶层与丸心质量比（X₁)、增溶层中PEG4000用量(X₂）、缓释层增重百分率（X₃），考察指标为4，8和24 h的累积释放度，采用Design-Expert软件建立模型描述自变量及响应值之间的关系，根据模型绘制效应面图和等高线图，通过重叠等高线图确定优化处方并通过实验对拟合结果进行验证。结果: 确定依托贝特的制备处方优化参数:增溶层与丸心质量比为0.7～1.2; PEG4000占增溶层比例为3.5%～12.8%;缓释层包衣增重8.0%～13.5%，与多元线性模型相比，二次多项式模型具较高的置信度;二次多项式模型方程表明考察因素和相对应的考察指标之间存在可信的定量关系;优化处方各考察指标的预测值和实际值非常接近。结论: 星点设计—效应面法可用于依托贝特缓释胶囊的处方优化，所建模型具有良好的预测能力。
经验技术交流
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  经验技术交流

  快速融化离心法与虹吸法制备冷沉淀的质量评价

  蒋燕，陈宝葵，林敏诗

  2012, 22(2): 167-168.

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  目的: 评价快速融化离心法与虹吸法制备冷沉淀的质量与制备效率，选择优质高效的冷沉淀制备方法。方法: 取新鲜冰冻原料血浆420袋，分为2组，每组有200 ml原料血浆90袋，100 ml原料血浆120袋，4名成分制备人员连续2日分别采用虹吸法与快速融化离心法制备冷沉淀，记录制备时间，计算制备效率。每组随机抽取100 ml原料血浆制备的冷沉淀30袋，使用半自动血凝仪检测冷沉淀的Ⅷ因子和纤维蛋白原含量，分别计算合格率。结果: 快速融化离心法和虹吸法制备冷沉淀Ⅷ因子含量分别为（70.9±8.3）IU和（45.9±7.6）IU，合格率分别为100%和  90%，差异均有统计学意义（P <0.05）;纤维蛋白原含量分别为（96.0±7.3）mg和（79.0±6.8）mg，合格率分别为100%和90%，差异均有统计学意义（P <0.05）。快速融化离心法和虹吸法制备效率分别为46 U/h和40 U/h。结论:   快速融化离心法制备冷沉淀具有优质高效的特点，值得推广。
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  经验技术交流

  替吉奥联合三维适形放疗治疗食管癌的疗效观察

  刘阳晨，周绍兵，高飞，尹小祥，叶宏勋，赵莺

  2012, 22(2): 169-170.

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  目的: 观察替吉奥联合三维适形放疗治疗食管癌的疗效。方法: 将86例食管癌患者随机分为放化疗组42例和单放组44例，两组均采用三维适形放射治疗，放化疗组于放疗的当天口服替吉奥60 mg/m²，2次/d，连用14 天后，间隔7天。21天为1个周期，共用两周期。结果: 放化疗组和单放组1、2年的生存率分别为80.1%（34/42）、 57.1%（24/42）和59.1%（26/44）、34.1%（15/44）（χ² =4.86、4.61，P <0.05）。治疗过程中的不良反应可以接受。结论: 替吉奥联合三维适形放疗治疗食管癌可以提高疗效，不良反应轻，患者耐受性好。
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  经验技术交流

  全髋关节置换手术患者麻醉维持期限制性输液复苏与高容量血液稀释应用比较

  王晓锋，刘海瑞

  2012, 22(2): 171-173.

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  目的: 探讨在麻醉维持期液体管理中运用限制性输液复苏（limited fluid resuscitation，LFR）和高容量血液稀释（acute hypervolemic hemodilution，AHH）两种不同的输液策略对总失血量和凝血功能的影响。方法: 选择32例全髋关节置换手术患者随机分LFR组和AHH组，每组16例。两组均用乳酸林格氏液与羟乙基淀粉溶液按体积比2∶ 1进行输注。在麻醉维持阶段AHH组采用高容量血液稀释策略（维持MAP于80 mmHg），LFR组采用限制性输液复苏策略（维持MAP于55～65 mmHg）。分别于降压即刻（T1）、维持阶段输液后1 h（T2）、术毕（T3）记录HR、Hb、Hct、PaO₂及电解质变化。术毕（T3）检测凝血功能，统计总失血量和补液量。结果:  LFR组较AHH组失血量减少，Hct水平在T2、T3时点LFR组高于AHH组，PT、APTT两项指标均较AHH组低。结论: 在较大手术中麻醉维持期液体管理采用LFR策略较少干扰血凝状态，在改善患者的凝血功能，减少出血，提高循环稳定性方面优于AHH。
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  经验技术交流

  自制麦克风导管芯在经鼻气管插管中的应用

  马从学，倪绍端，王丽，林光永

  2012, 22(2): 174-175.

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  经验技术交流

  人Bcl－w基因的克隆和原核表达

  戴晓莉，王敏，杜鸿

  2012, 22(2): 176-178.

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  目的: 克隆人Bcl-w基因并原核表达Bcl-w融合蛋白。方法: 提取人胃癌组织总RNA;采用RT-PCR方法扩增Bcl-w基因编码区，构建重组质粒pet28a/Bcl-w，转化大肠埃希菌ROS，测序鉴定后经增菌培养，30℃诱导6 h表达Bcl-w蛋白，免疫印迹法鉴定主要以包涵体形式存在的带有His标签的融合蛋白。结果: 从人胃癌组织中扩增得到Bcl-w基因，其编码区长582 bp，编码193个氨基酸，与基因库中发表的序列同源性100%;成功构建了原核表达载体pet28a/Bcl-w，并在工程菌ROS中获得大量表达。结论: 获得了人Bcl-w基因，成功制备出人Bcl-w融合蛋白，为进一步研究其生物学功能奠定了基础。
综述
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  综述

  综述颅骶疗法在康复医学中的应用及其前景

  狄荣科1，谭文捷2

  2012, 22(2): 179-182.

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