目的： 探究邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯（di-2-ethylhexyl phthalate，DEHP）损伤小鼠GC1 spg精原细胞功能的可能机制。方法： 采用不同浓度DEHP（0、30、60、90、120 μmol/L）处理GC-1 spg细胞，通过CCK8实验、克隆形成实验和Transwell实验检测细胞增殖和迁移能力的变化；化学分光光度比色法检测细胞内铁离子（Fe3+）和丙二醛的相对含量；蛋白质印迹实验检测细胞内铁死亡相关蛋白胱氨酸/谷氨酸逆转运蛋白（xCT）和谷胱甘肽过氧化物酶4（GPX4）的相对表达；细胞免疫荧光染色技术检测细胞内活性氧水平以及线粒体膜电位（JC-1）的改变。使用铁死亡抑制剂Ferrostatin-1（1 μmol/L）与DEHP（90 μmol/L）联合培养GC1 spg细胞24 h，CCK8实验检测细胞的增殖能力。结果： 与对照组（0 μmol/L）相比，30、60、90、120 μmol/L DEHP组细胞的增殖能力、克隆形成能力和迁移能力明显下降；丙二醛、活性氧、Fe3+（90、120 μmol/L DEHP组）含量明显升高；线粒体膜电位（60、90、120 μmol/L DEHP组）明显降低；GPX4（60、90、120 μmol/L DEHP组）和xCT蛋白表达水平明显降低。DEHP与Ferrostatin1联合培养后细胞增殖能力较DEHP单独培养明显提高。结论： DEHP能够抑制GC1 spg细胞的增殖和迁移能力，降低GPX4和xCT蛋白的表达，可能通过铁死亡途径引起细胞死亡。

 目的： 探讨星形胶质细胞（astrocyte,ASC）的缝隙连接蛋白Connexin43（Cx43）在调控细胞凋亡和铁死亡中的作用及机制。方法: 采用氧化血红素（hemin）处理ASC建立模拟脑出血后细胞凋亡和铁死亡的细胞模型，通过干扰慢病毒敲降ASC中Cx43表达，观察细胞对hemin诱导的凋亡和铁死亡的敏感性。通过基因集富集分析（gene set enrichment analysis，GSEA）预测Cx43参与调控细胞凋亡和铁死亡的可能机制。通过对Hippo信号通路的关键效应分子Yes相关联蛋白（Yes associated protein,YAP）进行免疫荧光染色以及使用抑制剂干预，对生信分析预测的信号通路进行验证。结果: 与对照组相比，hemin处理引起细胞凋亡和铁死亡比例显著增加（P<0.05）；相比单纯hemin处理组和阴性对照组（Cx43NC），Cx43敲降组（Cx43KD）细胞凋亡比例显著降低（P<0.05），铁死亡比例显著升高（P<0.05）。生信分析结果显示，Cx43与Hippo信号通路、铁离子结合基因集、脂质过氧化通路、缺氧应激等通路显著相关，进一步转录因子调控网络分析发现转录增强相关结构域（transcriptional enhanced associate domain，TEAD）转录因子家族中TEAD3可能参与调控Cx43相关性下游信号转导通路。免疫荧光染色结果显示，Cx43KD组YAP出现核转位，采用抑制剂阻断YAP和TEAD结合后，Cx43敲降引起的细胞凋亡抵抗和铁死亡增敏得到部分逆转。结论: Cx43敲降通过抑制Hippo通路，促进YAP核转位，与TEAD3结合形成转录复合体，调控ASC对hemin诱导的细胞凋亡抵抗和铁死亡增敏。

目的: 探讨醋酸棉酚（gossypol acetate,GAA）对人脑胶质瘤细胞铁死亡的影响。方法: 选取处于对数生长期的人脑胶质瘤U87MG、LN229和U251MG细胞,各分为2组,分别用0,10 μmol/L GAA处理,CCK-8法和克隆形成实验检测脑胶质瘤细胞增殖能力；实时荧光定量PCR和蛋白质免疫印迹法分别检测谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase 4,GPX4） mRNA和蛋白表达水平；化学发光法检测还原型谷胱甘肽（GSH）和丙二醛含量。另将3种人脑胶质瘤细胞分别用0、10 μmol/L GAA联合0、1 μmol/L Ferrostatin-1（铁死亡挽救剂）进行培养,CCK-8法检测细胞增殖率。结果: 与0 μmol/L GAA组相比,10 μmol/L GAA组U87MG、LN229和U251MG细胞相对增殖率和克隆形成能力明显下降（P均<0.05）,LN229和U251MG细胞中GPX4 mRNA和蛋白表达水平明显降低（P均<0.05）,GSH含量明显减少且代谢产物丙二醛含量明显增加（P<0.05）,而U87MG细胞内上述指标变化不明显（P＞0.05）。与10 μmol/L GAA+0 μmol/L Ferrostatin-1组相比,10 μmol/L GAA+1 μmol/L Ferrostatin-1组3种脑胶质瘤细胞相对增殖率明显升高（P均<0.05）。结论:GAA可以诱导脑胶质瘤细胞发生铁死亡,且LN229和U251MG细胞较U87MG细胞对GAA更敏感。

目的:  探讨去铁胺预处理对甲基汞毒性作用的影响及其潜在的机制。方法: 选用大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤PC12细胞与大鼠肝BRL细胞，对照组用含10%胎牛血清的高糖培养基培养0.5 h，甲基汞组用不同浓度甲基汞(1.0、2.5、5.0、10.0 μmol/L)处理0.5 h，MTT法检测细胞活力，免疫印迹法检测谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4，GPx4)蛋白表达，筛选最适浓度甲基汞。另取PC12细胞与BRL细胞，对照组用含10%胎牛血清的高糖培养基培养6.5 h，去铁胺+甲基汞组分别用0、50、100、200、400 μmol/L去铁胺预处理6 h，再用10.0 μmol/L甲基汞处理0.5 h，免疫印迹法检测GPx4及缺氧诱导因子-1α (hypoxia inducible factor-1α, HIF-1α)蛋白表达，MTT法检测细胞活力。结果：  与对照组相比，10.0 μmol/L甲基汞组两种细胞活力降低最显著，以此浓度进行后续实验；随着甲基汞浓度逐渐增加，两种细胞中GPx4表达逐渐降低。与0 μmol/L去铁胺+甲基汞组比较，随着去铁胺浓度增加，两种细胞中GPx4和HIF-1α蛋白表达逐渐增加；400 μmol/L去铁胺+甲基汞组PC12细胞活力明显增加，200 μmol/L去铁胺+甲基汞组BRL细胞活力明显增加。结论： 去铁胺可拮抗甲基汞致细胞的铁死亡，可能与上调HIF-1α及铁死亡关键调控因子GPx4表达相关。

铁死亡（ferroptosis）是一种新近定义的细胞死亡形式，与细胞凋亡、自噬以及其他形式的细胞死亡不同，其涉及铁和活性氧。目前研究表明，铁死亡与多种疾病的病理细胞死亡相关，如阿尔茨海默病、脑出血、创伤性脑损伤和缺血再灌注损伤等。此外，在多种肿瘤细胞中也发现铁死亡，其可能具有抑癌作用，并可用于治疗癌症。本文综述细胞铁死亡的可能机制，并回顾铁死亡在肝癌、卵巢癌、头颈部肿瘤以及其他肿瘤中的研究进展。

铁死亡(ferroptosis)是近年来新发现的一种细胞死亡方式，它与细胞内的氧化还原稳态失衡相关。与凋亡、坏死等传统的死亡方式不同，细胞内游离铁增多和脂质过氧化是铁死亡独特的代谢特征。大量研究表明，相比于正常细胞，肿瘤细胞需要更多的铁来维持生长，该特征导致肿瘤细胞对于铁死亡更加敏感。自发现铁死亡以来，学者们陆续提出利用铁死亡的方式杀伤肿瘤的治疗策略。本文针对铁死亡发生过程中肿瘤细胞内铁、脂质和氨基酸代谢的主要调控机制，以及其在胰腺导管细胞癌、肝细胞癌、胶质瘤和血液系统肿瘤中的研究进展进行归纳总结。

目的:  探讨二甲双胍是否能够逆转低氧诱导胰腺癌细胞对铁死亡诱导剂的抵抗，并进一步明确其作用机制。方法: 人胰腺癌Patu8988细胞分别在常氧和低氧下培养不同时间（0、12、24、48 h），CCK-8法检测细胞增殖，免疫印迹法检测缺氧诱导因子-1α（hypoxiainducible factor 1α，HIF1α）蛋白表达；用不同浓度铁死亡诱导剂Erastin分别处理常氧和低氧培养的Patu8988细胞，CCK-8法检测细胞活性；低氧培养的Patu8988细胞分别给予以下处理：对照组、二甲双胍、Erastin、二甲双胍联合Erastin，用CCK8法检测细胞活性，免疫印迹法检测谷胱甘肽过氧化物酶4（glutathione peroxidase 4，GPX4）蛋白表达；用不同浓度二甲双胍处理低氧培养的Patu8988细胞，免疫印迹法分别检测腺苷酸活化蛋白激酶（AMP-activated protein kinase, AMPK），雷帕霉素靶蛋白（mammalian target of rapamycin, mTOR），HIF-1α等蛋白表达。结果：  与常氧组相比，低氧抑制细胞增殖，且呈时间依赖性，在48 h差异最显著（P<0.05）；Erastin浓度为10 μmol/L时，低氧组细胞活性明显低于常氧组（P<0.05），为最佳实验浓度；低氧条件下，与单药处理组相比，二甲双胍联合Erastin可以显著抑制细胞活性，降低GPX4蛋白表达水平（P均<0.05）；二甲双胍能够激活AMPK，抑制mTOR磷酸化以及HIF-1α蛋白水平（P均<0.05）。结论： 二甲双胍能够通过AMPKmTOR轴减少HIF1α表达，从而逆转低氧诱导的胰腺癌细胞铁死亡抵抗。

目的:  探讨热休克蛋白5(heat shock protein family A member 5，HSPA5)对青蒿琥酯诱导人肝癌SMMC7721细胞株化疗敏感性的影响。方法: 用不同浓度青蒿琥酯处理SMMC-7721细胞，CCK-8法检测细胞活性，筛选最佳实验浓度。将SMMC-7721细胞按以下分组处理：对照组、青蒿琥酯组、青蒿琥酯+去铁胺组，用流式细胞术检测细胞内脂质来源活性氧水平；试剂盒检测细胞内丙二醛水平。用包装HSPA5干扰或过表达质粒的慢病毒感染SMMC7721细胞，qRTPCR和蛋白质印迹法分别测定转染后HSPA5 mRNA和蛋白表达；CCK-8法检测细胞活性，试剂盒检测细胞内丙二醛水平。结果： 青蒿琥酯浓度为20 μmol/L时，SMMC-7721细胞达到半数致死量，为最佳实验浓度；流式细胞术结果显示，青蒿琥酯处理的细胞内脂质来源活性氧水平、丙二醛水平明显升高，去铁胺可抑制青蒿琥酯导致的细胞内脂质来源活性氧和丙二醛升高(均P<0.05)；经过青蒿琥酯处理的HSPA5干扰组细胞活性水平明显低于未干扰组，丙二醛水平明显高于未干扰组(均P<0.05)。结论： 干扰HSPA5可能增强人肝癌SMMC-7721细胞株对青蒿琥酯的化疗敏感性。